| 查看: 2431 | 回复: 12 | |||
[交流]
成年SD大鼠脊髓背角神经元原代培养中,如何有效分离得到形态活力好的神经元
|
|||
|
虫友们,大家好。最近在做关于成年SD大鼠脊髓背角神经元原代培养。在实验的过程中遇到了些问题,想请教虫友们,请高手不吝赐教,多谢了! 先简单说一下我的protocol,材料:2 weeks SD大鼠;取材:戊巴比妥钠麻醉,小心解开脊髓腔,取出脊髓彭大部分,放至到冰冻的过滤除菌的ACSF中,剥离软脊膜,将脊髓移入4%FBS+DPBS中,剪刀剪碎。消化过程:先用DPBS洗两遍,用37℃ 0.125%Trypsin/EDTA消化2分钟,10%FBS终止消化。用1ml移液枪轻柔吹打脊髓,吹打过冲中添加0.1mg/ml DNase I。待溶液稍浑浊,静止,接种于24孔板,放至于37℃ CO2 incubator。 虫友们看一下我的protocol有没有严重理论错误?我的问题是,接种2天后换液,第三天能看到少量活的神经元和胶质细胞,但胞体较脏,胞体不知附着什么类似于组织碎片的东西,达不到试验要求。并且24孔板底部有大量组织碎片贴在孔底部,导致背景较脏。第五天后神经元就死亡了,坚持不了几天。 如何能使组织碎片较少,如何使细胞胞体干净通透?是从消化过程改进还是吹打方法上改进?请大家积极回帖,高手们不吝赐教。如果有较好的方法学文献更好了,我的金币不多,就100个金币,还请大家详细说说如何改进,谢谢! [ Last edited by chancety on 2013-11-6 at 20:42 ] |
» 猜你喜欢
复旦大学附属华东医院皮肤科石磊团队招收推免研究生(学术型)
已经有0人回复
期刊以西班牙语印刷,一定要用西班牙语写稿投稿吗?
已经有0人回复
中药学论文润色/翻译怎么收费?
已经有138人回复
skin research and technology支付APC后1个月了,还在制作中
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 抢金币啦!回帖就可以得到:
陕西科技大学轻工科学与工程学院硕士调剂
+5/505
江西科技师范大学 材料与能源招收调剂研究生
+1/92
西安石油大学新能源学院接收材料类、能源动力类、机械类、计算机类等专业专硕调剂生!
+1/90
华侨大学 材料专业 接收考研调剂
+1/88
北京印刷学院 [印刷电子工艺与装备]科研团队招收学硕专硕研究生调剂
+1/35
齐鲁工业大学(山东省科学院)海洋流体机械团队 2026 年博士研究生招生
+1/21
华南师范大学环境学院大分子体系多尺度模拟与实验研究团队招收2026年考研调剂生
+1/20
湖南理工大学,化学化工学院还有大量调剂名额
+1/20
2026年西华大学材料学院-材料近净成形与表面技术研究团队-招收调剂研究生
+1/11
大连工业大学招生 08工学:化工、环境、材料 07理学:化学 调剂招生!
+1/8
计算机学院招学硕大量调剂
+1/7
招调剂_北京农学院_植物保护系_昆虫方向_专硕_学硕各1名
+1/6
总分338求调剂,本科大连理工一志愿北航生医工083100
+1/6
太原科技大学材料科学与工程学院“03高性能轻质合金及新能源材料”学硕与专硕有缺额
+1/5
徐工-环境工程学院-招收调剂硕士
+1/4
哈尔滨工程大学动力学院赵建辉团队招收2026博士研究生
+1/4
招收材料 化工 环境 物理调剂
+1/4
招收【★计算化学、AI药物设计★】方向的硕士研究生(代码:1055/1007/0703)
+1/3
大连工业大学轻工与化学工程学院招工科调剂生
+2/2
点进来,有惊喜,保正经
+1/1
9楼2013-11-15 20:06:20
2楼2013-11-06 07:05:14
4楼2013-11-08 17:19:52
5楼2013-11-08 17:51:17
7楼2013-11-15 20:00:32
8楼2013-11-15 20:04:04
10楼2013-12-09 16:55:23
12楼2013-12-12 00:41:39
13楼2014-01-18 09:08:53
简单回复
sjmr12213楼
2013-11-06 07:12
回复
2013-11-08 18:38
回复
峰锋风逢烽11楼
2013-12-09 17:32
回复














回复此楼


