应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 成年SD大鼠脊髓背角神经元原代培养中，如何有效分离得到形态活力好的神经元
131/1返回列表
查看: 2830  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chancety

金虫 (小有名气)

[交流] 成年SD大鼠脊髓背角神经元原代培养中，如何有效分离得到形态活力好的神经元

虫友们，大家好。最近在做关于成年SD大鼠脊髓背角神经元原代培养。在实验的过程中遇到了些问题，想请教虫友们，请高手不吝赐教，多谢了！
    先简单说一下我的protocol，材料：2 weeks SD大鼠；取材：戊巴比妥钠麻醉，小心解开脊髓腔，取出脊髓彭大部分，放至到冰冻的过滤除菌的ACSF中，剥离软脊膜，将脊髓移入4%FBS+DPBS中，剪刀剪碎。消化过程：先用DPBS洗两遍，用37℃ 0.125%Trypsin/EDTA消化2分钟，10%FBS终止消化。用1ml移液枪轻柔吹打脊髓，吹打过冲中添加0.1mg/ml DNase I。待溶液稍浑浊，静止，接种于24孔板，放至于37℃ CO2 incubator。
    虫友们看一下我的protocol有没有严重理论错误？我的问题是，接种2天后换液，第三天能看到少量活的神经元和胶质细胞，但胞体较脏，胞体不知附着什么类似于组织碎片的东西，达不到试验要求。并且24孔板底部有大量组织碎片贴在孔底部，导致背景较脏。第五天后神经元就死亡了，坚持不了几天。
    如何能使组织碎片较少，如何使细胞胞体干净通透？是从消化过程改进还是吹打方法上改进？请大家积极回帖，高手们不吝赐教。如果有较好的方法学文献更好了，我的金币不多，就100个金币，还请大家详细说说如何改进，谢谢！

[ Last edited by chancety on 2013-11-6 at 20:42 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-11-06 00:26:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小苦孩纸

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
chancety: 金币+10, 最多给10个 2013-11-15 20:07:39
好巧！我也做这个！有相同疑问！忘以后多多交流！
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2013-11-15 20:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

jinwei331

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
…………………………
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-06 07:05:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chancety

金虫 (小有名气)
我去，没人回复呀。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
4楼2013-11-08 17:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浩喜2005

木虫 (著名写手)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
chancety: 金币+10, 谢谢，虽然……但是，哈哈 2013-11-11 00:20:39
祝福顶贴赚金币
楼主不会对我这样敬业的选手只给一两个金币的！
赞一下 回复此楼
5楼2013-11-08 17:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小苦孩纸

金虫 (小有名气)
神作！
回复此楼
7楼2013-11-15 20:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chancety

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小苦孩纸 at 2013-11-15 20:00:32
神作！

简单回复没法给金币
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-15 20:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windbells636

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
chancety: 金币+10 2014-01-18 16:35:50
成年的做起来活性都不高的，只有乳鼠高
赞一下 回复此楼
10楼2013-12-09 16:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chancety

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by windbells636 at 2013-12-09 16:55:23
成年的做起来活性都不高的，只有乳鼠高

嗯，是的

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
12楼2013-12-12 00:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyang-0531

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
chancety: 金币+10 2014-01-18 16:35:58
这个没做过，我们做乳鼠心肌细胞的培养，消化那一步是最重要的。你认为组织碎片较多，可以试试过筛吧，这个我没做过，具体步骤不太懂，我是从我的培养心肌细胞方面说的，呵呵
赞一下 回复此楼
13楼2014-01-18 09:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
sjmr12213楼
2013-11-06 07:12   回复  
qiongjiewei6楼
2013-11-08 18:38   回复  
峰锋风逢烽11楼
2013-12-09 17:32   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 chancety 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +4 wangyl_123 2026-10-10 8/400 2026-10-12 18:09 by wangyl_123
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +5 Isak0320 2026-10-12 7/350 2026-10-12 18:03 by 有人要害朕
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 6/300 2026-10-12 14:55 by 简单化xn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭