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chrisdonkey

金虫 (小有名气)

[求助] 反相HPLC柱压过高 已有11人参与

柱子是月旭的C18柱,流动相为乙腈:水=38:62,pH 2.2。
去年这个时候开始用的,当时流速1 mL/min 时,柱压大概7、8 MPa,室温。
后来有一阵子没用,今年3月份的时候再用,流速1 mL/min 时柱压达到11 MPa,但也可以用,柱温升高到35℃,压力可以控制在10 MPa以下。
前两天再用的时候,流速0.6 mL/min时柱压达到10.6MPa,就没敢再增加流速,换了90%的乙腈冲洗,流速0.6 mL/min时柱压为3 MPa,与以前的情况相似,再换回流动相冲洗,柱压又升高,流速0.4 mL/min时柱压为7.6 MPa。
求问可能是哪方面的原因呢?如果是柱子有问题,可是用90%乙腈冲洗的时候就正常。我也怀疑是不是流动相的问题,所以又进行了一次抽滤脱气处理,换回去再冲洗就是流速0.4 mL/min柱压7.6 MPa的情况,没敢再升流速,停止之后用90%冲洗了近一个小时,就关机把柱子换下来了。
说明一下,去年用含盐的流动相测过别的东西,但是有用50%的甲醇过渡,而且后来再使用乙腈水的流动相时也没有什么问题,柱压只比最开始高一点点。柱子不用的时候是保存在90%的乙腈里。
求各位大侠支招啊,我没有系统地学习过,现在是两眼一抹黑
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chrisdonkey

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fagui168 at 2014-05-04 09:05:39
你用10%的乙腈冲一会 ,然后换到100%的乙腈多冲一会  看看效果怎么样  还是不太好的话 就直接用100%甲醇 多冲一会

好的,我试一下
5楼2014-05-04 09:22:33
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你用纯乙腈冲柱试试,另外,色谱柱不用的时候,不都是用纯乙腈封住吗?
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
2楼2014-05-04 08:51:58
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fagui168

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用10%的乙腈冲一会 ,然后换到100%的乙腈多冲一会  看看效果怎么样  还是不太好的话 就直接用100%甲醇 多冲一会
改变你不能改变的,适应你不能适应的
3楼2014-05-04 09:05:39
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chrisdonkey

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2014-05-04 08:51:58
建议你用纯乙腈冲柱试试,另外,色谱柱不用的时候,不都是用纯乙腈封住吗?

是因为一开始工程师说如果常用的话就最后用90%的乙腈冲洗,后来做别的实验去了,只是偶尔用一下,可能这方面会有些影响吧。那我以后就保存在纯乙腈里吧
4楼2014-05-04 09:21:53
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