24小时热门版块排行榜    

查看: 1137  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

84146922

金虫 (小有名气)

[求助] 相关native page的想象的讨论 已有3人参与

我his柱纯化了一个蛋白,然后过凝胶柱,只有一个峰,将蛋白进行SDS-PAGE时候,有单一的目的带
而进行native-PAGE的时候,却有两条带,一条粗的带,应该是我的目的带,上面还有一条细带
如果那条细带是多聚体的形式存在,那么为什么过凝胶柱的时候却只有一个峰?
那个多聚体可能是在加入native-PAGE 的loading的时候,形成的多聚体吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heylixing

铁虫 (正式写手)

就是普通的PAGE,跑个非还原的,就可以确定是不是多聚。
7楼2014-05-04 21:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励交流! 2014-05-04 02:06:33
1.过亲和柱的时候,如果几个峰重叠在一起,那显示出来就是一个峰了。从同一个峰中收集的蛋白,跑电泳时有几条带很常见的。
2.聚体的形成可能在你上柱之前,只是洗脱的时候聚体峰和单体峰重叠了,所以看不出来。Ni柱亲和是根据His标签和Ni柱亲和力来分离的,而不是根据分子量大小来分的。
3.也有可能是蛋白纯化之后再形成聚体,未纯化的时候杂蛋白比较多,对聚体形成有影响,纯化后聚体形成比较容易。
2楼2014-05-03 22:54:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

84146922

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-05-03 22:54:11
1.过亲和柱的时候,如果几个峰重叠在一起,那显示出来就是一个峰了。从同一个峰中收集的蛋白,跑电泳时有几条带很常见的。
2.聚体的形成可能在你上柱之前,只是洗脱的时候聚体峰和单体峰重叠了,所以看不出来。Ni柱 ...

你好,1、2、3都很有道理,谢谢~
但是我是先过了Ni柱,然后再过凝胶柱,是根据分子大小来分开的...
所以想再请问下....还是原问题,谢谢...
3楼2014-05-04 11:04:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 84146922 at 2014-05-04 11:04:46
你好,1、2、3都很有道理,谢谢~
但是我是先过了Ni柱,然后再过凝胶柱,是根据分子大小来分开的...
所以想再请问下....还是原问题,谢谢......

那就可能是在纯化之后page之前形成的聚体了。你先确认一下分子量是不是单体的整数倍,要对不上就有可能是其他原因了。
4楼2014-05-04 11:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] 帮忙看看fileCode +3 wwncly 2026-08-10 5/250 2026-08-10 19:06 by 2000zf36392
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +3 瞬息宇宙 2026-08-10 3/150 2026-08-10 18:27 by Tide man
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见