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zdq249

铁虫 (初入文坛)

[求助] DEAE柱装柱问题,上样液浓度已有2人参与

本人刚开始做多糖,我想自己装一个常压的DEAE-52柱子,我看很多虫友都是装的那种HPLC的柱子,关于上样液浓度问题,有的人说10mg/ml有的说1mg/ml,我都觉得可能浓度有点低,大神们,我有一公斤的干样品,大概能上多少G的多糖呢?还有装常压柱有的人说粗短一些好?是这样吗?
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sunnielee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zdq249(星海慧儿代发): 金币+1, 很有帮助,多谢回帖交流。 2014-05-04 11:04:00
是常压的那种体积很大的柱子吗?我以前常用1L的柱子做制备,个人经验不必纠结于浓度,只要溶解了就行,因为是离子交换,又不是分子筛。但总的上样量还是要控制下,过量了还是不行。不知道你是用什么洗脱溶液?
2楼2014-04-30 11:36:53
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gfshksdl

新虫 (小有名气)


能溶即可
3楼2014-05-04 10:40:59
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zh1306l

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

上样浓度和柱子高度都需要实验确定。我做的时候,浓度高,上样体积小,层析时候分级效果好。柱子在满足分离效果前提下,短一些,反压低,操作周期短

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-05-04 16:27:27
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elsa2005

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnielee at 2014-04-30 11:36:53
是常压的那种体积很大的柱子吗?我以前常用1L的柱子做制备,个人经验不必纠结于浓度,只要溶解了就行,因为是离子交换,又不是分子筛。但总的上样量还是要控制下,过量了还是不行。不知道你是用什么洗脱溶液?

你好,我现在也做多糖,请问1L的柱子直径和长度是多少?我的多糖的得率在6%左右,为了测结构想上样量大一点的话,至少要提多少公斤?
5楼2014-10-16 17:01:47
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