应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MTT做细胞毒性测试问题
151/2返回列表12下一页
查看: 3403  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

[求助] MTT做细胞毒性测试问题 已有2人参与

我做纳米材料载盐酸阿霉素DOX进细胞，但是做MTT细胞毒性测试实验得到的数据里，加药孵化后数据与空白对照没有区别，孵化时间4h，12h，24h，48h都做过，结果还是一样，问题出在哪里呢？而且做24h和48h这两次的时候，加了MTT过4h后，细胞培养液变成了紫黑色，这是染菌了还是正常现象呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-29 15:14:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
luo_jiaojiao: 金币+1, ★有帮助 2014-04-30 15:28:15
培养基变紫黑色，很大可能是染菌了，阿霉素装载之后做MTT要加阿霉素裸药作对照，或许你的浓度不够，不知道做的是哪种细胞？
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
2楼2014-04-29 19:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
luo_jiaojiao: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-04-30 15:28:05
呵呵，我课题组同学跟你做的很像，也是DOX。紫黑色的话只要是不太深就正常，要是黑的不透明就是染菌了。你的各浓度DOX不起作用可能是药物就没有在你的载体上。你用什么手段测试的你制备后的载体+DOX的？
赞一下 回复此楼
为爱而生
3楼2014-04-29 21:38:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hsingyu at 2014-04-29 19:37:07
培养基变紫黑色，很大可能是染菌了，阿霉素装载之后做MTT要加阿霉素裸药作对照，或许你的浓度不够，不知道做的是哪种细胞？

啊，真的是染菌啊……我加的是50ul的DOX和150ul的DMEM，最终药的浓度是5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,50ug/ml,100ug/ml，药的浓度达到50ug/ml后就有很多药吸附在板子上面，加MTT前洗好多遍都洗不掉呢，A549肺癌细胞。
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-30 15:24:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-04-29 21:38:22
呵呵，我课题组同学跟你做的很像，也是DOX。紫黑色的话只要是不太深就正常，要是黑的不透明就是染菌了。你的各浓度DOX不起作用可能是药物就没有在你的载体上。你用什么手段测试的你制备后的载体+DOX的？

可能真的是染菌了，我之前把枪头弄掉在PBS里面了的……我直接加的free dox呢，之前加了好几次载药的材料都没现象，我就直接做free dox了。载药后有测紫外，然后做了confocal也有看到材料和药进细胞了，现在就是愁MTT啊
赞一下 回复此楼
5楼2014-04-30 15:27:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-04-30 15:27:47
可能真的是染菌了，我之前把枪头弄掉在PBS里面了的……我直接加的free dox呢，之前加了好几次载药的材料都没现象，我就直接做free dox了。载药后有测紫外，然后做了confocal也有看到材料和药进细胞了，现在就是愁M ...

你把培养液调成PH7.2左右再过滤，这样得到的medium大概7.3-7.4，我上学期培养基碳酸氢钠加的是1.5克，老是染菌。这学期改成3.7克怎么瞎搞都没事儿。上次配药忘了灭10微升枪头，直接酒精泡了泡就配药了，细胞没有染菌
还有要确认一下 药物（纳米颗粒）跟MTT反应吗？用不含血清的培基混合MTT然后给细胞加上会不会好点儿？
赞一下 回复此楼
为爱而生
6楼2014-05-02 09:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-02 09:25:02
你把培养液调成PH7.2左右再过滤，这样得到的medium大概7.3-7.4，我上学期培养基碳酸氢钠加的是1.5克，老是染菌。这学期改成3.7克怎么瞎搞都没事儿。上次配药忘了灭10微升枪头，直接酒精泡了泡就配药了，细胞没有染 ...

我们平时是从生物公司买了DMEM直接过滤了再加血清和双抗配成培养液使用，没有去调pH，感觉太麻烦了，反正癌细胞的生命力还是比较顽强的，呵呵。药物和MTT会不会反应应该怎么确认呢？种板之后加药诱导前，培养基已经换成仅DMEM的了，加MTT之前有先把旧培养基和药弃掉，加上新鲜DMEM，然后加的MTT。但是用酶标仪测出来的OD值跟空白对照的细胞一样啊……何解？
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-05 14:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-05 14:18:35
我们平时是从生物公司买了DMEM直接过滤了再加血清和双抗配成培养液使用，没有去调pH，感觉太麻烦了，反正癌细胞的生命力还是比较顽强的，呵呵。药物和MTT会不会反应应该怎么确认呢？种板之后加药诱导前，培养基已经 ...

感觉还是染菌可能性大。不调PH也可，只要碳酸氢钠按照DMEM盒子上要求的加就好了。如果是铺板后染菌的，那操作还是注意下吧。
赞一下 回复此楼
为爱而生
8楼2014-05-06 09:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-06 09:51:21
感觉还是染菌可能性大。不调PH也可，只要碳酸氢钠按照DMEM盒子上要求的加就好了。如果是铺板后染菌的，那操作还是注意下吧。...

染菌了会使得紫外吸收值增大吗？
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-07 16:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-07 16:12:05
染菌了会使得紫外吸收值增大吗？...

这个真不清楚，不过MTT对细菌敏感，估计染菌就肯定很不准
赞一下 回复此楼
为爱而生
10楼2014-05-07 22:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 luo_jiaojiao 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 302求调剂 +10 呼呼呼。。。。 2026-03-17 10/500 2026-03-18 12:45 by Linda Hu
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭