| 查看: 2809 | 回复: 18 | |||
[求助]
悬浮细胞MTT法求助 已有7人参与
|
|||
|
我这个新手最近一直在做脾细胞MTT实验，发现实验重现性很不好，就找了一下原因 1、可能是接种密度的问题 2、后来保证了同时做两块板的细胞相同，可结果还是不好，又找原因可能是加完MTT后有些结晶就吸出来，可是这个度把握不好，不吸干净就会残留培养基影响吸光度。因为条件有限，没有平板离心机，除了吸出来还能怎么办呢？用注射器吸吗？ 3、网上查了一下，有人说悬浮细胞可以使用三联溶解液，这样就不用吸出来了，可是我用的96孔板，每个孔已经有100微升悬液和100微升药物，孔的容积已经不够再加100溶解液了，这时候怎么办呢？（前提是药物体积如果加的太少，误差也很大，而且不均匀，所以我没有选择只加10微升，而是配成一定浓度后加100或50微升）  求各位大神帮忙解决一下我的困惑，多谢了 |
回复此楼» 猜你喜欢
278求调剂
已经有3人回复
-
289求调剂
已经有8人回复
-
303求调剂
已经有6人回复
-
求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343
已经有5人回复
-
271求调剂
已经有3人回复
-
318求调剂
已经有3人回复
-
07化学280分求调剂
已经有7人回复
-
化学调剂
已经有6人回复
-
318求调剂
已经有8人回复
-
0703化学求调剂
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- MTT得到的细胞存活率和流式（双染）得到的存活率有联系吗
已经有5人回复
- 求助CCK8法测悬浮细胞增殖，如何检测
已经有7人回复
- 关于悬浮细胞MTT的一点疑问，求解答！
已经有11人回复
- 请教关于MTT脾淋巴细胞增殖问题
已经有11人回复
- 用于MTT的肿瘤细胞
已经有1人回复
- 关于细胞毒性MTT实验
已经有12人回复
- MTT中OD值很大，但细胞密度适中，为什么？
已经有6人回复
- 关于MTT加液与弃液的一些思考与疑问
已经有6人回复
- 【求助/交流】淋巴细胞 传代问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】MTT法确定药物对细胞的作用浓度范围 结果如何分析
已经有21人回复
- 【求助】MTT测试细胞增殖曲线
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于MTT检测淋巴细胞活性的若干问题，请教各位大侠~~
已经有11人回复
- 【求助/交流】细胞MTT试验DMSO
已经有7人回复
- 【求助】关于MTT实验的问题请教
已经有11人回复
- 什么是 MTT assay
已经有7人回复
yinhl623
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2019.1
- 散金: 24
- 红花: 5
- 帖子: 219
- 在线: 434.7小时
- 虫号: 1205795
- 注册: 2011-02-18
- 性别: GG
- 专业: 组织工程与再生医学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
koalading: 金币+25, ★★★很有帮助, 不仅对实验有帮助，还从心态上帮助了我，十分感谢 2014-02-20 19:04:01
koalading: 金币+25, ★★★很有帮助, 不仅对实验有帮助，还从心态上帮助了我，十分感谢 2014-02-20 19:04:01
| MTT实验本来准确度就不高，再说你用的是悬浮细胞，不离心的话很多紫色结晶物肯定会随着细胞被吸出来，孔间结果必然会很不均一。建议CCK8，没必要为老板节约这么点钱，老板的基金就是为了做实验用的，早点出成果比节约那点钱对老板更有利。假若老板见你长时间没做出好的结果，他不会考虑到是因为你节约钱才造成这种局面，只会觉得你能力不行，你自己也会越来越不自信，以后要买更贵的试剂就更不敢向老板提了，从此就陷入了越来越被动的怪圈。建议在老板有实验经费的情况下，尽量用好的试剂。至少，在实验结果与预期不符的时候，你可以首先排除试剂的原因，从而更容易找到解决的办法或者发现新的问题。 |
17楼2013-12-28 15:55:32
5楼2013-12-24 13:33:24
10楼2013-12-25 23:05:37
wangkaibo123
荣誉版主 (职业作家)
kerry
-
专家经验: +726 - PhEPI: 3
- 应助: 1928 (讲师)
- 贵宾: 0.598
- 金币: 7869.1
- 散金: 10156
- 红花: 100
- 帖子: 3780
- 在线: 1007.1小时
- 虫号: 2088618
- 注册: 2012-10-26
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
- 管辖: 药学
11楼2013-12-25 23:13:33
2楼2013-12-23 18:38:21
3楼2013-12-24 10:45:41
4楼2013-12-24 12:43:10
6楼2013-12-24 16:08:30
7楼2013-12-25 15:26:10
8楼2013-12-25 15:28:16
9楼2013-12-25 16:22:07
