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丫头“笑笑”

银虫 (小有名气)

[求助] hepg2 细胞复苏 已有8人参与

我一个月前冻存的细胞,复苏两次了,都以失败告终啊。复苏时细胞量挺多的,但过夜后贴壁的细胞极少,换液后就剩一点儿了。如下图:



继续培养几天就这样了:



知道怎么回事嘛?我的冻存步骤是:收集细胞,加入1ml冻存液(10%DMSO)。4度10min,20度30min,-80度过夜,然后保存在液氮中。
复苏步骤是:从液氮中取出一管细胞后立即放入37度水浴中解冻,快速解冻后,再加入新鲜培养基过夜培养,换液。


能看出我的问题在哪嘛?
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我要我的自由!
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ohneyzhang

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我和楼主遇到的问题一样,细胞也不是污染,就是状态很差!我的问题是出在血清了。换BI血清后长势迅猛。
10楼2014-04-25 23:28:47
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