24小时热门版块排行榜    

查看: 3473  |  回复: 19

钢琴兔

银虫 (小有名气)

[求助] 有关用酶标仪测蛋白质表面疏水性的问题 已有3人参与

没有荧光分光光度计,但是想用ANS荧光探针法测定蛋白质的表面疏水性。之前用了酶标仪做的,数据出来后以荧光强度对蛋白质浓度作线性回归,要求R2》=0.99,可是我的数据一点也不好:
蛋白质浓度mg/ml   荧光强度
0.1697                   1224.8
0.5091                   1252.15
0.8485                   1209.05
1.1879                   1220.15
有做过的前辈分享一下经验吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-08-09 07:29:31
弱弱的橙色  就是很浅很浅的  你买的ANS盐 还是就ANS啊  感觉ANS不好溶啊...

其实,我们通常都会用一点点氢氧化钠,然后略微调一下PH
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
16楼2014-08-10 21:41:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

你用的激发波长是多少?
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
2楼2014-05-01 16:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-01 16:18:56
你用的激发波长是多少?

我用了340nm  也有文献说用390nm
3楼2014-05-03 08:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyb346

金虫 (正式写手)

我想问一下,你用的ANS是磺酸形式,还是它的镁盐或者钠盐?他们之间有什么区别?
4楼2014-05-12 10:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunrisejj

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的数据太少了,你blank值是多少?仪器的Gain值是如何设置的?有无副孔?另外我个人认为仅取四个点做标曲可能不够,应该适当增加。
5楼2014-05-29 16:09:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gyb346 at 2014-05-12 10:25:05
我想问一下,你用的ANS是磺酸形式,还是它的镁盐或者钠盐?他们之间有什么区别?

ANS磺酸形式,这个在pH7 下不好溶,虽然文献上都报道说用pH 7的缓冲溶液配制,但是我试过了,没法完全溶解啊,后来加了一点氢氧化钠溶液才溶解的,我猜就是生成了ANS钠盐,这个比较好溶解。我听说直接买ANS钠盐就行,因为ANS真心不好溶
6楼2014-05-30 09:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sunrisejj at 2014-05-29 16:09:58
你的数据太少了,你blank值是多少?仪器的Gain值是如何设置的?有无副孔?另外我个人认为仅取四个点做标曲可能不够,应该适当增加。

后来又做了很多,一个浓度做了5个孔,空白就是缓冲溶液,数据还是很差劲,有些缓冲溶液的吸光值都比样品大了,哭···
什么叫仪器的Gain值,副孔啊,求教~~~~
7楼2014-05-30 09:09:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyb346

金虫 (正式写手)

钠盐价格较贵,可镁盐也不好溶。谢谢分享!酶标仪属微量法,条件略有不同,你仔细看看。我用荧光计的。
8楼2014-06-02 22:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyb346

金虫 (正式写手)

数据不好只能重做。而且注意是荧光增量,就是要扣除蛋白本底。
9楼2014-06-02 22:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

861565768

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做过考马斯亮蓝法对同浓度蛋相同白质不同时间的时间依赖性的疏水性分析,至于ANS恐怕只有用荧光测了,需要多测,最好波长扫描,定激发发射测比较不准,特别是荧光强度不大的情况下

[ 发自小木虫客户端 ]
世界那么乱、装纯给谁看、、、
10楼2014-06-03 08:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 钢琴兔 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见