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钢琴兔

银虫 (小有名气)

[求助] 有关用酶标仪测蛋白质表面疏水性的问题 已有3人参与

没有荧光分光光度计,但是想用ANS荧光探针法测定蛋白质的表面疏水性。之前用了酶标仪做的,数据出来后以荧光强度对蛋白质浓度作线性回归,要求R2》=0.99,可是我的数据一点也不好:
蛋白质浓度mg/ml   荧光强度
0.1697                   1224.8
0.5091                   1252.15
0.8485                   1209.05
1.1879                   1220.15
有做过的前辈分享一下经验吗?
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861565768

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做过考马斯亮蓝法对同浓度蛋相同白质不同时间的时间依赖性的疏水性分析,至于ANS恐怕只有用荧光测了,需要多测,最好波长扫描,定激发发射测比较不准,特别是荧光强度不大的情况下

[ 发自小木虫客户端 ]
世界那么乱、装纯给谁看、、、
10楼2014-06-03 08:42:36
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

你用的激发波长是多少?
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
2楼2014-05-01 16:18:56
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-01 16:18:56
你用的激发波长是多少?

我用了340nm  也有文献说用390nm
3楼2014-05-03 08:52:40
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gyb346

金虫 (正式写手)

我想问一下,你用的ANS是磺酸形式,还是它的镁盐或者钠盐?他们之间有什么区别?
4楼2014-05-12 10:25:05
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