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钢琴兔

银虫 (小有名气)

[求助] 有关用酶标仪测蛋白质表面疏水性的问题 已有3人参与

没有荧光分光光度计,但是想用ANS荧光探针法测定蛋白质的表面疏水性。之前用了酶标仪做的,数据出来后以荧光强度对蛋白质浓度作线性回归,要求R2》=0.99,可是我的数据一点也不好:
蛋白质浓度mg/ml   荧光强度
0.1697                   1224.8
0.5091                   1252.15
0.8485                   1209.05
1.1879                   1220.15
有做过的前辈分享一下经验吗?
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sunrisejj at 2014-05-29 16:09:58
你的数据太少了,你blank值是多少?仪器的Gain值是如何设置的?有无副孔?另外我个人认为仅取四个点做标曲可能不够,应该适当增加。

后来又做了很多,一个浓度做了5个孔,空白就是缓冲溶液,数据还是很差劲,有些缓冲溶液的吸光值都比样品大了,哭···
什么叫仪器的Gain值,副孔啊,求教~~~~
7楼2014-05-30 09:09:57
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

你用的激发波长是多少?
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
2楼2014-05-01 16:18:56
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-01 16:18:56
你用的激发波长是多少?

我用了340nm  也有文献说用390nm
3楼2014-05-03 08:52:40
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gyb346

金虫 (正式写手)

我想问一下,你用的ANS是磺酸形式,还是它的镁盐或者钠盐?他们之间有什么区别?
4楼2014-05-12 10:25:05
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