| 查看: 1005 | 回复: 10 | ||||
lyz65956木虫 (正式写手)
|
[交流]
求助关于质粒
|
|
有一批别人赠送的克隆质粒， 各种原因， 无法知道其详细信息。 知道有我的目的基因大概七八千， 但是由于是环状DNA想通过测序找到其线性化位点 试过许多的通用引物 比如 M13 T7等 测序了大部分。 其中有小部分无法测序成功，或者测到的序列为载体序列，将测到的序列比对发现为载体序列 但是有很多的载体， 请问有什么办法可以测序，判断出到底什么载体 或者更好的办法知道 目的基因的线性位点 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有296人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助高手帮我画个质粒图，有已知序列
已经有7人回复
- 求助——质粒构建问题
已经有10人回复
- 关于质粒图谱绘制的问题。。急
已经有4人回复
- 新手求助——质粒电泳条带问题
已经有15人回复
- 提不出质粒，不知道出了什么问题，求助……
已经有17人回复
- 求助关于质粒提取的若干问题，谢谢了！！
已经有5人回复
- [求助]质粒消除
已经有4人回复
- 求助啊！转质粒出现问题了！
已经有13人回复
- 关于质粒保存率
已经有4人回复
- 【求助/交流】质粒的不相容性
已经有7人回复
- 【求助/交流】质粒电泳
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于质粒上终止子的疑问
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
已经有18人回复
- 【求助/交流】怎么判断质粒的大小
已经有3人回复
- 【求助/交流】质粒的几个问题，诱变及表达的选择
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于质粒DNA转化中，Ca离子的作用问题.谢谢！
已经有11人回复
- 【求助/交流】关于质粒构建与表达的问题
已经有14人回复
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10391.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
2楼2014-04-11 14:18:54
lyz65956
木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 5483.2
- 散金: 21
- 帖子: 312
- 在线: 260.6小时
- 虫号: 1617917
- 注册: 2012-02-15
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2014-04-11 14:21:18
★
lyz65956(金币+1): 谢谢参与
lyz65956(金币+1): 谢谢参与
 |
4楼2014-04-11 14:26:38
 |
5楼2014-04-11 14:37:31
|
|
6楼2014-04-11 14:38:40
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10391.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我大概懂你的情况了，就是说你要的基因，自然情况也是个圈，现在套在更大的一个质粒圈里面了？ 然后还有七八千。。。 一个省事的办法，就是继续测，总能测到载体上的，这样你一旦知道一个头，肯定另一个也知道了。 另一个复杂一点也不见得搞得出来的办法，找到你基因上的酶切位点， 两两组合去切 虽然载体上可能也有这个位点会掉下来片段，但是应该不影响 关注你两两组合的产物大小存不存在 比如HindIII BamHI XhoI XbaI 比如HindIII和BamHI中间应该是2K，如果掉下来是2K，那说明这中间是连着的 如果掉下来不是2K，变得很大，那说明线性化装入载体这个大圈的位置应该就在这两个位点中间。 呵呵，这个等于在做物理图谱了 虽然麻烦一点，但是可能会比测序更快，你一次可以切很多组合。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
lyz659567楼2014-04-11 14:41:10
|
|
8楼2014-04-11 14:44:34
 |
9楼2014-04-11 14:50:19
lyz65956
木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 5483.2
- 散金: 21
- 帖子: 312
- 在线: 260.6小时
- 虫号: 1617917
- 注册: 2012-02-15
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2014-04-11 15:05:31
