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ranran1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 玻璃珠提取DNA,关于玻璃珠的一些问题 已有1人参与

小虫,刚开始用0.5mm的玻璃珠提取微量真菌DNA,书上说不建议使用未酸洗的玻璃珠,关于玻璃珠有几个问题想请教下大神们。
1、未酸洗的玻璃珠和酸洗的,在提取DNA上有什么区别吗,原理是什么。
2、酸洗玻璃珠能回收利用吗?若能,怎么进行回收。求方法
3、未酸洗的玻璃珠可否处理成酸洗玻璃珠?若能,,怎么处理
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d00614028

银虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
ranran1990: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-04 13:34:20
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-04 13:47:33
1. 酸洗的目的是使玻璃珠表面形成小孔,在震荡的时候更好的破碎细胞,破碎的效率应该比不酸洗的好点。
2. 酸洗当然能回收,我一般用1:20的盐酸浸泡过夜(记住封口),第二天倒掉酸液,用水洗10遍,然后风干,进行利用。
3. 在2中已经回复了。
另外,看看这个帖子吧,我也在里面应助了。http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7168291&pid=9#pid9
2楼2014-04-04 13:11:23
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ranran1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-04 13:11:23
1. 酸洗的目的是使玻璃珠表面形成小孔,在震荡的时候更好的破碎细胞,破碎的效率应该比不酸洗的好点。
2. 酸洗当然能回收,我一般用1:20的盐酸浸泡过夜(记住封口),第二天倒掉酸液,用水洗10遍,然后风干,进行 ...

1(浓盐酸):20(纯水)?也有的地方说是用其他酸(如硝酸),这是否是利用酸来腐蚀珠子表面形成小孔?
3楼2014-04-04 13:22:25
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ranran1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-04 13:11:23
1. 酸洗的目的是使玻璃珠表面形成小孔,在震荡的时候更好的破碎细胞,破碎的效率应该比不酸洗的好点。
2. 酸洗当然能回收,我一般用1:20的盐酸浸泡过夜(记住封口),第二天倒掉酸液,用水洗10遍,然后风干,进行 ...

问一下有一些地方说玻璃珠有吸附DNA的作用。这个岂不是降低了DNA提取效果,求解惑。
还有形成小孔怎么提高破碎效果啊?怎么理解捏
4楼2014-04-04 13:28:22
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d00614028

银虫 (小有名气)

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引用回帖:
3楼: Originally posted by ranran1990 at 2014-04-04 13:22:25
1(浓盐酸):20(纯水)?也有的地方说是用其他酸(如硝酸),这是否是利用酸来腐蚀珠子表面形成小孔?...

是的,硝酸也是可以的。
5楼2014-04-04 13:28:32
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d00614028

银虫 (小有名气)

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ranran1990: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-04-04 13:38:13
引用回帖:
4楼: Originally posted by ranran1990 at 2014-04-04 13:28:22
问一下有一些地方说玻璃珠有吸附DNA的作用。这个岂不是降低了DNA提取效果,求解惑。
还有形成小孔怎么提高破碎效果啊?怎么理解捏...

吸附DNA的疑问我部清楚,但至少我在用的时候效果挺好的。震荡的时候有孔的或者说形状不规格的玻璃珠比圆形的效果要好狠多的,我想象的是处理后的玻璃珠类似于磨过的刀锋,未处理过的类似于钝的。。。。。
6楼2014-04-04 13:32:58
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ranran1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-04 13:28:32
是的,硝酸也是可以的。...

这个,酸:水的比例,还有可以使用的酸,选择依据是什么啊
7楼2014-04-04 13:33:55
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d00614028

银虫 (小有名气)

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ranran1990: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-04-04 13:57:36
引用回帖:
7楼: Originally posted by ranran1990 at 2014-04-04 13:33:55
这个,酸:水的比例,还有可以使用的酸,选择依据是什么啊...

经验。。。可以用硝酸也可以用盐酸,但要记住,处理后一定要洗干净,至少闻着没酸的味道。。。
8楼2014-04-04 13:40:36
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