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从发酵液中提取胞外蛋白 已有3人参与
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1、目的是要从发酵液当中提取根霉表达的胞外蛋白，采用的是硫酸铵沉淀的方法，95%的饱和度： 按理说，硫酸铵在水中的溶解度很大的，虽说95%饱和度是比较高，但是慢慢溶解的话，最后还是会完全融掉的，但是这次到最后下面却还有好多没能溶解，难道说培养基中的配方对最后的硫酸铵沉淀有影响吗？ 配方当中无机盐就是磷酸氢二钾和七水合硫酸镁，其他的都是有机物质，此疑问一； 2、还是在用95%饱和度的硫酸铵沉淀蛋白当中出现的问题： 在加入硫酸铵的过程中，发酵液中会出现一些粘粘的、棕色的东西，并且会粘在壁上，后来用手一摸就感觉是油脂类的东西，而且加硫酸铵到最后，这类物质会和蛋白质结合到一块，这样会减少蛋白量。而我要提取发酵液当中的胞外蛋白，所以全部的蛋白都要，所以大家有方法能去除这类油脂性物质吗？此疑问二； 3、采用硫酸铵沉淀时，不管转子转的怎么慢，硫酸铵每次加的怎么少，在发酵液的上面还是会出现一些白色的物质，师姐说这是蛋白变性了，那我应该怎么办才能避免出现这样的情况呢？还有如果这些是变性了的蛋白，硫酸铵加到最后还会复性吗？这对后续步骤会有多大的影响？此疑问三。 |
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3楼2014-04-09 12:48:43
baoqie121314 
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30