24小时热门版块排行榜    

查看: 1405  |  回复: 5

yvonne_mi

木虫 (正式写手)

[求助] 求助分离纯化高手

本人做的是放线菌发酵液胞外多糖的提取和分离纯化,试验流程是这样的:用黄豆培养基得到的发酵液上清减压浓缩,乙醇醇沉,分别得到上清1和沉淀1,乙醇醇沉完的上清液1再次甲醇醇沉,分别得上清2和沉淀2.
小老板之前做的是沉淀1中的多糖的提取,我也做过,做到后来发现没有活性,就没往后做。后来发现甲醇醇沉的沉淀2有活性。硫酸苯酚检测有糖的颜色反应,不含蛋白质,怀疑有一种低聚糖(分子量在1500以下),所以开始做的它的分离纯化。
目前做过各种方法纯化,DEAE-52,凝胶,阴阳离子交换树脂,大孔树脂,都没得到理想的结果。在这里最困扰我的是培养基里的盐组分,因为用到的是海水晶,所以不知道会是什么盐最后在我的粗品里,而且由于分子量不大除盐很困难。所以想请教一下这方面的高手指导我一下,有什么比较好的方法来分离纯化出我想要的组分。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yvonne_mi

木虫 (正式写手)

忘记标明了  我的粗品极易溶于水,拿凝胶收到的一部分不是很纯的组分点了硅胶G板在紫外365nm下中间是暗斑,只有最外面的边是荧光的,不知道怎么回事,是不纯的原因?同时也做了三氟乙酸的酸水解,发现120度12h很难水解,但是从液相上分析还是出现了一部分葡萄糖,另外就是我的那个组分峰和组分旁边的一个峰,怀疑是葡萄糖水解后留下来的那部分。
2楼2013-05-16 14:41:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是考虑除盐的话,可以做透析,或者超滤除盐。
3楼2013-05-16 14:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yvonne_mi

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ericyo918 at 2013-05-16 14:58:20
如果是考虑除盐的话,可以做透析,或者超滤除盐。

我能买到的透析袋最额小截留分子量是1000,我做过,结果我的粗品也透掉了,问过生工,100的巨贵!
4楼2013-05-16 15:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

wizardfan: 因为你的回答没有起到作用 2013-05-17 08:07:09
引用回帖:
4楼: Originally posted by yvonne_mi at 2013-05-16 16:17:19
我能买到的透析袋最额小截留分子量是1000,我做过,结果我的粗品也透掉了,问过生工,100的巨贵!...

楼主别回复啊,来点实惠的。巨贵是多贵?呵呵
5楼2013-05-16 15:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangdayuan

金虫 (小有名气)

可以用凝胶过滤G10应该可以除盐,而你的样品不会下来
顺其自然,为所当为
6楼2013-09-25 14:29:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yvonne_mi 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 3/150 2026-08-27 00:09 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +3 a089 2026-08-26 3/150 2026-08-26 23:21 by young90
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
请填处理意见