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[求助]
求助分离纯化高手
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本人做的是放线菌发酵液胞外多糖的提取和分离纯化,试验流程是这样的:用黄豆培养基得到的发酵液上清减压浓缩,乙醇醇沉,分别得到上清1和沉淀1,乙醇醇沉完的上清液1再次甲醇醇沉,分别得上清2和沉淀2. 小老板之前做的是沉淀1中的多糖的提取,我也做过,做到后来发现没有活性,就没往后做。后来发现甲醇醇沉的沉淀2有活性。硫酸苯酚检测有糖的颜色反应,不含蛋白质,怀疑有一种低聚糖(分子量在1500以下),所以开始做的它的分离纯化。 目前做过各种方法纯化,DEAE-52,凝胶,阴阳离子交换树脂,大孔树脂,都没得到理想的结果。在这里最困扰我的是培养基里的盐组分,因为用到的是海水晶,所以不知道会是什么盐最后在我的粗品里,而且由于分子量不大除盐很困难。所以想请教一下这方面的高手指导我一下,有什么比较好的方法来分离纯化出我想要的组分。 |
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ericyo918
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