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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达载体在大肠5a中的表达
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cgh20031695

新虫 (初入文坛)

[求助] 表达载体在大肠5a中的表达已有2人参与

用的表达载体是pyes2，有氨苄抗性，长度5.9kb，连接目的片段后，往5a里面转，结果一个也没长，请大侠帮忙分析下？
补充，之前富集载体的时候，也是用5a做的克隆啊，效果还好。
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1楼2014-04-01 09:06:01
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cm8002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-03 00:05:18
cgh20031695: 金币+5, ★有帮助, 谢谢了，浓度也测过了，好像也不行。 2014-04-03 08:57:19
与载体的关系不是很大一般，关键是连接的步骤要做好，建议酶切载体和目的片段后大致定量后做连接，优化连接体系
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2楼2014-04-02 21:36:39
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cm8002

金虫 (小有名气)
载体应该是双酶切吧，要确保载体完全双切成功额
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3楼2014-04-03 14:18:10
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cgh20031695

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cm8002 at 2014-04-03 14:18:10
载体应该是双酶切吧，要确保载体完全双切成功额

是双酶切，并且跑过胶，亮度还可以
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4楼2014-04-04 12:47:37
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可能连接转化没做好，再做一次试试

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-04-05 20:11:52
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