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天生我材必有用

1楼2014-03-27 15:16:01

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wyy080214

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【答案】应助回帖

1、流动相问题
2、紫外灯寿命问题
3、色谱柱问题

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18楼2014-04-01 21:09:04

普通回帖

st.nova2012

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问题太简略了
你用的什么仪器条件？

2楼2014-03-27 16:47:26

喜马拉雅战士

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2楼: Originally posted by st.nova2012 at 2014-03-27 16:47:26
问题太简略了
你用的什么仪器条件？

甲醇：磷酸缓冲盐（pH=4）=60:40
紫外检测波长：230nm

天生我材必有用

3楼2014-03-27 18:36:37

xiaoxususy

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【答案】应助回帖

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不定是流动相的问题

决定你高度的，是你对自己的要求。

4楼2014-03-27 20:26:55

lifucheng

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【答案】应助回帖

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230nm最好不要用甲醇楼主是单泵走的还是打比例走的？此外灯的能量是否还够？

5楼2014-03-27 20:46:32

st.nova2012

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3楼: Originally posted by 喜马拉雅战士 at 2014-03-27 18:36:37
甲醇：磷酸缓冲盐（pH=4）=60:40
紫外检测波长：230nm...

如果是固定比例流动相的话，建议你将两相配到一起，超声混匀（最好过滤一下，你这个有缓冲盐）后再试试。
灯的能量一般影响没这么大。
再就可能是你柱子污染了，我觉得柱子问题的可能性比较大，有条件的话，换一根柱子，没有备用柱的话，最好充分洗洗你的柱子。
你是C18柱吗？

6楼2014-03-28 21:33:34

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6楼: Originally posted by st.nova2012 at 2014-03-28 21:33:34
如果是固定比例流动相的话，建议你将两相配到一起，超声混匀（最好过滤一下，你这个有缓冲盐）后再试试。
灯的能量一般影响没这么大。
再就可能是你柱子污染了，我觉得柱子问题的可能性比较大，有条件的话，换一 ...

是C18柱，我的甲醇和缓冲盐分别超声过的，而且时间还不短。打算换根新柱子试试了，谢谢你的建议哦！

天生我材必有用

7楼2014-03-28 22:39:18

喜马拉雅战士

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5楼: Originally posted by lifucheng at 2014-03-27 20:46:32
230nm最好不要用甲醇楼主是单泵走的还是打比例走的？此外灯的能量是否还够？

紫外灯确实已经很长时间了，实验室是打算换紫外灯了。希望换了之后基线会平稳一点吧

天生我材必有用

8楼2014-03-28 22:40:53

喜马拉雅战士

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4楼: Originally posted by xiaoxususy at 2014-03-27 20:26:55
不定是流动相的问题

流动相应该是没有问题的，我现在试可行，是完全按照文献里的比例来做的，还没怎么优化呢

天生我材必有用

9楼2014-03-28 22:42:44

炜少

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美女，这样的问题一个就是你的流动相污染了，或者是你仪器的混悬器不好用了，没能充分混合，或者有可能是脱气机的问题，不知道你用的是几元泵，其他的管路是否空了，如果你不走梯度的话建议把2个流动相先混合后试试，6：4的比例，不知道你盐浓度是否很高，如果较浓的话2相混合时会析晶的，堵泵堵柱子，压力就会上去了。

Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.

10楼2014-03-29 08:34:48