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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC基线漂移的问题
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喜马拉雅战士

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC基线漂移的问题 已有8人参与

紫外灯开了2个小时后基线还是漂移得很厉害，进样后就这样了，求大神指导。

HPLC基线漂移的问题
图片1.png
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天生我材必有用
1楼 2014-03-27 15:16:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

1、流动相问题
2、紫外灯寿命问题
3、色谱柱问题
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18楼2014-04-01 21:09:04
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普通回帖

st.nova2012

新虫 (小有名气)
问题太简略了
你用的什么仪器条件？
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2楼2014-03-27 16:47:26
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喜马拉雅战士

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by st.nova2012 at 2014-03-27 16:47:26
问题太简略了
你用的什么仪器条件？

甲醇：磷酸缓冲盐（pH=4）=60:40
紫外检测波长：230nm
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天生我材必有用
3楼2014-03-27 18:36:37
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xiaoxususy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不定是流动相的问题
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决定你高度的，是你对自己的要求。
4楼2014-03-27 20:26:55
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
230nm最好不要用甲醇 楼主是单泵走的还是打比例走的？此外 灯的能量是否还够？
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5楼2014-03-27 20:46:32
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st.nova2012

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 喜马拉雅战士 at 2014-03-27 18:36:37
甲醇：磷酸缓冲盐（pH=4）=60:40
紫外检测波长：230nm...

如果是固定比例流动相的话，建议你将两相配到一起，超声混匀（最好过滤一下，你这个有缓冲盐）后再试试。
灯的能量一般影响没这么大。
再就可能是你柱子污染了，我觉得柱子问题的可能性比较大，有条件的话，换一根柱子，没有备用柱的话，最好充分洗洗你的柱子。
你是C18柱吗？
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6楼2014-03-28 21:33:34
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喜马拉雅战士

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by st.nova2012 at 2014-03-28 21:33:34
如果是固定比例流动相的话，建议你将两相配到一起，超声混匀（最好过滤一下，你这个有缓冲盐）后再试试。
灯的能量一般影响没这么大。
再就可能是你柱子污染了，我觉得柱子问题的可能性比较大，有条件的话，换一 ...

是C18柱，我的甲醇和缓冲盐分别超声过的，而且时间还不短。打算换根新柱子试试了，谢谢你的建议哦！
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天生我材必有用
7楼2014-03-28 22:39:18
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喜马拉雅战士

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2014-03-27 20:46:32
230nm最好不要用甲醇 楼主是单泵走的还是打比例走的？此外 灯的能量是否还够？

紫外灯确实已经很长时间了，实验室是打算换紫外灯了。希望换了之后基线会平稳一点吧
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天生我材必有用
8楼2014-03-28 22:40:53
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喜马拉雅战士

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoxususy at 2014-03-27 20:26:55
不定是流动相的问题

流动相应该是没有问题的，我现在试可行，是完全按照文献里的比例来做的，还没怎么优化呢
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天生我材必有用
9楼2014-03-28 22:42:44
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
美女，这样的问题一个就是你的流动相污染了，或者是你仪器的混悬器不好用了，没能充分混合，或者有可能是脱气机的问题，不知道你用的是几元泵，其他的管路是否空了，如果你不走梯度的话建议把2个流动相先混合后试试，6：4的比例，不知道你盐浓度是否很高，如果较浓的话2相混合时会析晶的，堵泵堵柱子，压力就会上去了。
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
10楼2014-03-29 08:34:48
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