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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC基线跑不平
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虫子驾到

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC基线跑不平 已有6人参与

我的流动相是甲醇/0.05%的三乙胺水溶液，70/30，基线跑了两个小时都不平。前面用甲醇，90%的水，基线都很好，请教各位大侠，这是啥原因呢？
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1楼 2014-03-24 12:05:10
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merry1987

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
虫子驾到: 金币+2, ★有帮助 2014-03-24 19:19:56
辣笔v小新: 金币+2, 鼓励应助交流 2014-03-24 21:28:00
一般三乙胺加多了会出现这种情况，用来改善峰型的话1000ml里加一滴应该就行了
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别人怎么看你，和你无关，做好自己。
2楼2014-03-24 14:35:33
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虫子驾到

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by merry1987 at 2014-03-24 14:35:33
一般三乙胺加多了会出现这种情况，用来改善峰型的话1000ml里加一滴应该就行了

600ml加了200μl，用磷酸调PH7.8，C18柱，耐受PH范围2~8.
尝试把检测波长调大，基线灰常平，但是不是我要的波长，再把波长往回调，又不行...
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3楼2014-03-24 19:19:05
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七喜丸子

金虫 (小有名气)

一枚苦逼的搬砖民工

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢回复！ 2014-03-25 00:17:32
虫子驾到: 金币+2, ★有帮助 2014-03-25 13:10:38
先0.5的流速100%有机相平衡到一条直线，然后调到0.5流速的70%有机相到直线，最后把流速改为1试试看.
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Keelahse'lai
4楼2014-03-25 00:05:02
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merry1987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 虫子驾到 at 2014-03-24 19:19:05
600ml加了200μl，用磷酸调PH7.8，C18柱，耐受PH范围2~8.
尝试把检测波长调大，基线灰常平，但是不是我要的波长，再把波长往回调，又不行......

你这流动相PH值太大了，最好用耐酸碱的柱子。还有就是可以试试加一滴三乙胺后调PH值，或者是加缓冲盐后再加三乙胺，最后调PH值，甲醇换成乙腈也可以试试。
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别人怎么看你，和你无关，做好自己。
5楼2014-03-25 08:35:13
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虫子驾到

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 七喜丸子 at 2014-03-25 00:05:02
先0.5的流速100%有机相平衡到一条直线，然后调到0.5流速的70%有机相到直线，最后把流速改为1试试看.

嗯，试一下，谢谢啦！
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6楼2014-03-25 13:11:02
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虫子驾到

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by merry1987 at 2014-03-25 08:35:13
你这流动相PH值太大了，最好用耐酸碱的柱子。还有就是可以试试加一滴三乙胺后调PH值，或者是加缓冲盐后再加三乙胺，最后调PH值，甲醇换成乙腈也可以试试。...

我测的组份是碱性的，用纯水拖尾严重，想加点三乙胺调峰形，难道不是要让流动相稍微成碱性么？
不好意思，菜鸟一个，呵呵，请教啦...
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7楼2014-03-25 13:13:55
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以考虑换个碱性柱
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8楼2014-03-25 13:18:42
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merry1987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 虫子驾到 at 2014-03-25 13:13:55
我测的组份是碱性的，用纯水拖尾严重，想加点三乙胺调峰形，难道不是要让流动相稍微成碱性么？
不好意思，菜鸟一个，呵呵，请教啦......

哦哦，是的，碱性样品流动相最好也是偏碱性的，但也不一定非要那么高，也不一定必须用三乙胺，有时引入缓冲盐峰型也会有变化。可以试试碱性缓冲盐，然后用酸调PH 至7左右，保留时间太靠前的话有时通过调整流动相比例也是有帮助的。希望能帮到你，成功了之后可以相互交流哦~
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别人怎么看你，和你无关，做好自己。
9楼2014-03-25 15:21:08
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虫子驾到

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by merry1987 at 2014-03-25 15:21:08
哦哦，是的，碱性样品流动相最好也是偏碱性的，但也不一定非要那么高，也不一定必须用三乙胺，有时引入缓冲盐峰型也会有变化。可以试试碱性缓冲盐，然后用酸调PH 至7左右，保留时间太靠前的话有时通过调整流动相比 ...

呵呵，谢谢啦！
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10楼2014-03-26 09:39:42
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