应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我用非变性聚丙酰胺跑pcr产物，跑不出多态性
171/2返回列表12下一页
查看: 1841  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

BBMXM

新虫 (初入文坛)

[求助] 我用非变性聚丙酰胺跑pcr产物，跑不出多态性 已有7人参与

我跑的pcr产物跑大板，跑出都是一条带，帮分析一下，我要的目的是两条带或三条，找多态性，下面是跑的图片，跑了好多都是单一条带，但是测序结果显示是有多态性的，帮帮分析一下

我用非变性聚丙酰胺跑pcr产物，跑不出多态性
2D10RX4`%1QEFY`EBO}D(]K.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-21 09:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yuanyuanlg01

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-24 18:52:22
楼主可以尝试一下用14的胶跑，电压120V，我看你的胶图条带拖尾很严重。你是想在胶图上看到明显的PCR多态性是吗？那你多态性的测试用的什么方法，不同多态性之间大概的带电量和分子量差别怎样，我仔细看了一下胶图，你marker的尾端很干净，但是PCR产物的尾端对比起来明显有拖痕。我没做过PCR产物的多态性实验，不过从胶图上看，我觉得你可以改变一下实验条件使得多态性尽可能明显，并且做一对正负control。电压调低一些减少拖痕。希望有所帮助，多多交流。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2014-03-24 17:49:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是胶的分辨率不行啊？
赞一下 回复此楼
2楼2014-03-21 10:46:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶没制好，跑电泳时注意保持电流恒定
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-21 10:52:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BBMXM

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-21 10:46:50
是不是胶的分辨率不行啊？

我用12%的丙烯酰胺凝胶，所有的试剂都是新配的
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-21 13:09:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BBMXM

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yipan at 2014-03-21 10:52:28
胶没制好，跑电泳时注意保持电流恒定

我用的是电压是300v，5分钟，然后是120v的电压12个小时
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-21 13:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BBMXM

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yipan at 2014-03-21 10:52:28
胶没制好，跑电泳时注意保持电流恒定

电压要保持在多少比较好啊，跑多长时间
赞一下 回复此楼
6楼2014-03-21 13:13:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yipan

铜虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by BBMXM at 2014-03-21 13:10:44
我用的是电压是300v，5分钟，然后是120v的电压12个小时...

不应该变换电压
回复此楼
7楼2014-03-21 13:13:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by BBMXM at 2014-03-21 13:09:12
我用12%的丙烯酰胺凝胶，所有的试剂都是新配的...

你PCR产物多大？
多态性相差多大？
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-21 16:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BBMXM

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-21 16:03:38
你PCR产物多大？
多态性相差多大？...

PCR产物大约220bp，A碱基变为G碱基
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-24 11:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by BBMXM at 2014-03-24 11:10:02
PCR产物大约220bp，A碱基变为G碱基...

220nt，多态性还是碱基类型变了DNA长度没变化，12%的PAGE没有区别很正常。
赞一下 回复此楼
10楼2014-03-24 15:48:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 BBMXM 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +5 陌の森林 2026-03-18 5/250 2026-03-18 22:18 by bingxueer79
[考研] 材料专硕英一数二306 +4 z1z2z3879 2026-03-18 4/200 2026-03-18 20:00 by 楤哥
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 9/450 2026-03-18 15:05 by stone_128
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +7 手机用户 2026-03-17 7/350 2026-03-18 14:34 by vgtyfty
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +4 ioodiiij 2026-03-17 4/200 2026-03-18 12:36 by Linda Hu
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭