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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yuanyuanlg01

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-24 18:52:22
楼主可以尝试一下用14的胶跑,电压120V,我看你的胶图条带拖尾很严重。你是想在胶图上看到明显的PCR多态性是吗?那你多态性的测试用的什么方法,不同多态性之间大概的带电量和分子量差别怎样,我仔细看了一下胶图,你marker的尾端很干净,但是PCR产物的尾端对比起来明显有拖痕。我没做过PCR产物的多态性实验,不过从胶图上看,我觉得你可以改变一下实验条件使得多态性尽可能明显,并且做一对正负control。电压调低一些减少拖痕。希望有所帮助,多多交流。
11楼2014-03-24 17:49:41
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诸葛小汐

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

那可能是你的样品木有多态性

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-03-24 18:11:05
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yangxp2006

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 22:21:37
snp的话,引物得设计酶切位点,酶切后再跑电泳,220bp用4%琼脂糖电泳就行

[ 发自小木虫客户端 ]
13楼2014-03-25 23:21:55
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huangglen

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-26 12:32:45
直接pcr后电泳看多态性?何不做个rflp?我觉得楼主跑胶没问题。问题出在多态性检测方法

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
14楼2014-03-25 23:36:45
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BBMXM

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by huangglen at 2014-03-25 23:36:45
直接pcr后电泳看多态性?何不做个rflp?我觉得楼主跑胶没问题。问题出在多态性检测方法

我的序列上没有匹配的酶切位点,做不了rflp
15楼2014-03-31 11:19:46
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yangxp2006

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by BBMXM at 2014-03-31 11:19:46
我的序列上没有匹配的酶切位点,做不了rflp...

dcaps,在引物上引入错配碱基,形成酶切位点,就可以了

[ 发自小木虫客户端 ]
16楼2014-04-01 07:40:25
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BBMXM

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-24 15:48:23
220nt,多态性还是碱基类型变了DNA长度没变化,12%的PAGE没有区别很正常。...

那怎么办,用什么方法区分多态性
17楼2014-07-15 11:59:58
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