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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 关于用DPPH法测定自由基清除能力
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kankan19858578

金虫 (正式写手)

[求助] 关于用DPPH法测定自由基清除能力 已有1人参与

方法：
1） 样品配制：0.2g/L,0.4g/L,0.6g/L,0.8g/L,1g/L的对香豆酸甲醇溶液
2） 0.2mL样品+5mL 2×10-4M DPPH                                              A
0.2mL样品+5mL 95%甲醇                                      B
0.2mL去离子水+5mL  2×10-4M DPPH                                    blank1
0.2mL去离子水+5mL   95%甲醇                           blank2
25℃反应30min，4000rpm离心10min，上清液517下测A值
P（%）=[1 - （A1-A2）/A3]×100
A1=A517 of A；A2=A517 of B；A3=A517 of blank1 - A517 of blank2
    各位做过相关实验的朋友，为什么我按照以上方法做，三十分钟以后A和B的颜色差不多啊，DPPH的紫色没有明显变浅啊！？
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1楼 2014-03-13 21:00:40
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wlw1002

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们加DPPH后不离心，是不是离心带来的？
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4楼2014-03-14 09:43:22
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wlw1002

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kankan19858578: 金币+50 2014-03-14 10:04:42
我们是这样做的
取0.2 mmol/L DPPH 2 mL于比色管中，加入2 mL不同浓度（0、0.5、1、2、5、10 mg/mL）的样品溶液，于室温下避光静置30 min，以70%乙醇水溶液作参比，在517 nm下测定吸光度，记为A0；以等量蒸馏水代替样品溶液，测定其吸光度，记为A1。取2 mL待测液加2 mL溶剂，测定吸光度，记为A2。按下式计算DPPH•清除率。以同样的方法测定Vc的DPPH•清除能力，作为对照。
DPPH•清除率/%＝[1－(A1－A2)/A0]×100
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2楼2014-03-14 09:22:33
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wlw1002

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

刚才的那个弄错了，我们与你的方法一样，A和B的颜色差不多可能是因为样品的清除自由基的能力不强，可以加大浓度试试
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3楼2014-03-14 09:35:19
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wlw1002

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

才搞明白！A和blank1比才说明DPPH是否变浅，因为A是样品加DPPH应该是紫色或紫色褪去（看样品的浓度和清除能力），blank1是水+DPPH  ，是紫色， B中是样品加甲醇，B应是样品本身颜色，A和B颜色差不多说明清除能力很强啊
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5楼2014-03-14 09:57:09
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