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落于忘川

铜虫 (初入文坛)

[求助] DPPH抗氧化实验相关问题 已有1人参与

我做的是木瓜中SOD酶的抗氧化,想先测一下清除DPPH的效果,但是DPPH要用醇溶解,这样的话会把蛋白质沉淀了,很有可能就使SOD变性,对以后的纯化之类的都会有影响,想问一下有没有解决的方法呢?

还有我用的公式是  清除率=1-(A sample- A blank)/ A control
A sample:样品+DPPH
A blank ;样品+ 乙醇
A control:DPPH + 水
想问一下测分光的时候调零点的空白应怎么配
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测酶的活性怎么会拿DPPH试验?!
酶的抗氧化和化学物质抗氧化的机制完全不一样
SOD是把超氧自由基分解了;DPPH assay是DPPH自由基被抗氧化剂清除
你把DPPH法用在SOD上,测定的就是SOD蛋白样品本身对自由基的清除效果,和酶活没有关系
2楼2013-10-29 18:52:45
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落于忘川

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2013-10-29 18:52:45
测酶的活性怎么会拿DPPH试验?!
酶的抗氧化和化学物质抗氧化的机制完全不一样
SOD是把超氧自由基分解了;DPPH assay是DPPH自由基被抗氧化剂清除
你把DPPH法用在SOD上,测定的就是SOD蛋白样品本身对自由基的清除 ...

我是想既测SOD清除超氧自由基的效果,又测清除DPPH的效果,这样应该可以吧
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3楼2013-10-30 00:24:44
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 落于忘川 at 2013-10-30 00:24:44
我是想既测SOD清除超氧自由基的效果,又测清除DPPH的效果,这样应该可以吧...

那可以用ABTS自由基,效果和DPPH基本一样,反应是在水溶液中进行
4楼2013-10-30 19:25:45
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落于忘川

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2013-10-30 19:25:45
那可以用ABTS自由基,效果和DPPH基本一样,反应是在水溶液中进行...

如果用DPPH的话,测分光是用醇溶液调零吗
爱上一个认真的消遣,用一朵花开的时间
5楼2013-10-31 11:46:24
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 落于忘川 at 2013-10-31 11:46:24
如果用DPPH的话,测分光是用醇溶液调零吗...

可以。
清除能力=(样品+DPPH醇溶液)-(样品+醇)
还是想说一句,SOD做DPPH实在是太别扭了
6楼2013-10-31 18:37:47
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lovelantian

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2013-10-31 18:37:47
可以。
清除能力=(样品+DPPH醇溶液)-(样品+醇)
还是想说一句,SOD做DPPH实在是太别扭了...

您好,我最近在做黄酮的抗氧化实验,也是做DPPH的清除率。
我看的文献上,空白(样品加乙醇)对照是(水加DPPH加乙醇)
样品是(样液加DPPH加乙醇)。清除率=1-(样品-空白)/对照
我想问问,我调零的参比是用纯乙醇吗?我之前一直是用的(乙醇加DPPH),测的吸光度都是负数,我想请教一下是不是我的参比做错了
7楼2015-02-04 13:00:05
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齐宝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by lovelantian at 2015-02-04 13:00:05
您好,我最近在做黄酮的抗氧化实验,也是做DPPH的清除率。
我看的文献上,空白(样品加乙醇)对照是(水加DPPH加乙醇)
样品是(样液加DPPH加乙醇)。清除率=1-(样品-空白)/对照
我想问问,我调零的参比是用纯 ...

应该是用醇溶液调零就可以,然后按照公式计算,不过好像有的用甲醇、有的是用98%还是95%的乙醇。
8楼2015-05-23 22:00:12
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