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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » ！求高人指点！抗氧化性测定的时候加入无机盐或者DPPH后浑浊咋办？
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)

[求助] ！求高人指点！抗氧化性测定的时候加入无机盐或者DPPH后浑浊咋办？ 已有1人参与

我在测定多肽的抗氧化性的时候，离心后都是澄清的，但是一加试剂比如乙醇，FeSO4，DPPH的时候就浑浊，根本测不出吸光度，咋办？请求高人指点！我就一个金币，可怜我下吧~
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1楼 2013-03-19 14:49:18
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是你溶液里面蛋白含量比较高，加这些试剂进去使蛋白变性形成沉淀。再一个DPPH清除能力测定时，DPPH不溶于水，当你溶液里含水多时，DPPH会析出产生沉淀。你可以尝试将反应体系离心后测定一下
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2楼2013-03-21 09:32:51
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-21 09:32:51
可能是你溶液里面蛋白含量比较高，加这些试剂进去使蛋白变性形成沉淀。再一个DPPH清除能力测定时，DPPH不溶于水，当你溶液里含水多时，DPPH会析出产生沉淀。你可以尝试将反应体系离心后测定一下

离心后沉淀吸附颜色了，颜色比较浅了。
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3楼2013-03-21 22:35:48
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 硕梦宝贝 at 2013-03-21 22:35:48
离心后沉淀吸附颜色了，颜色比较浅了。...

你测定DPPH就是要样品的颜色比空白浅，这才说明你的多肽具有DPPH清除能力。你可以做一下不同浓度的样品加入DPPH后沉淀出现的情况，如果是浓度的问题，那就以后测定时采用低浓度。在就是做一下Vc对照，看是不是你溶液配制方面的问题
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4楼2013-03-22 16:15:14
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硕梦宝贝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-22 16:15:14
你测定DPPH就是要样品的颜色比空白浅，这才说明你的多肽具有DPPH清除能力。你可以做一下不同浓度的样品加入DPPH后沉淀出现的情况，如果是浓度的问题，那就以后测定时采用低浓度。在就是做一下Vc对照，看是不是你溶 ...

那还原力要是离心的话，上层的色就成负的了，而且绿色都字沉淀里了
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5楼2013-03-23 09:43:12
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sunnymen

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 硕梦宝贝 at 2013-03-23 09:43:12
那还原力要是离心的话，上层的色就成负的了，而且绿色都字沉淀里了...

那你用VC做一下对照，看到底是蛋白样品问题还是实验试剂的问题
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6楼2013-03-25 16:58:39
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七小艾

新虫 (小有名气)
同悲剧，样品是多糖，DPPH和还原力也都浑浊了，还原力是连VC都浑浊了。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-03-26 08:18:27
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盼盼食品

木虫 (小有名气)
请问楼主的问题解决了么 我也遇到了类似的问题，  能问一下楼主是怎么解决的么 ？
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一个有理想爱读书的吃货~
8楼2013-10-09 10:22:42
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heiyezi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 盼盼食品 at 2013-10-09 10:22:42
请问楼主的问题解决了么 我也遇到了类似的问题，  能问一下楼主是怎么解决的么 ？

我也在DPPH的时候产生了沉淀，求指点12，谢谢
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9楼2015-10-23 11:46:38
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
硕梦宝贝(99503102代发): 金币+3, 回帖很精彩，继续加油！ 2015-11-06 13:57:22
你的多肽可以溶解在含有乙醇的水溶液中，这个比例自己可以看下，DPPH的也用一样的比例的溶剂溶解，反应时会减少沉淀的产生，关键是注意保证溶剂都能溶解你的样品和DPPH。实在不行，你反应后离心观察，浑浊的话就要条件溶剂体系了，透明有颜色可以继续做。，之所以沉淀是因为溶剂体系的问题。调节下就好。
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既往不恋，纵情向前！
10楼2015-11-05 15:15:29
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