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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DPPH抗氧化实验相关问题
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落于忘川

铜虫 (初入文坛)

[求助] DPPH抗氧化实验相关问题 已有1人参与

我做的是木瓜中SOD酶的抗氧化，想先测一下清除DPPH的效果，但是DPPH要用醇溶解，这样的话会把蛋白质沉淀了，很有可能就使SOD变性，对以后的纯化之类的都会有影响，想问一下有没有解决的方法呢？

还有我用的公式是  清除率=1-（A sample- A blank）/ A control
A sample:样品+DPPH
A blank ；样品+ 乙醇
A control：DPPH + 水
想问一下测分光的时候调零点的空白应怎么配
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爱上一个认真的消遣，用一朵花开的时间
1楼 2013-10-29 01:38:54
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测酶的活性怎么会拿DPPH试验？！
酶的抗氧化和化学物质抗氧化的机制完全不一样
SOD是把超氧自由基分解了；DPPH assay是DPPH自由基被抗氧化剂清除
你把DPPH法用在SOD上，测定的就是SOD蛋白样品本身对自由基的清除效果，和酶活没有关系
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2楼2013-10-29 18:52:45
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落于忘川

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2013-10-29 18:52:45
测酶的活性怎么会拿DPPH试验？！
酶的抗氧化和化学物质抗氧化的机制完全不一样
SOD是把超氧自由基分解了；DPPH assay是DPPH自由基被抗氧化剂清除
你把DPPH法用在SOD上，测定的就是SOD蛋白样品本身对自由基的清除 ...

我是想既测SOD清除超氧自由基的效果，又测清除DPPH的效果，这样应该可以吧
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爱上一个认真的消遣，用一朵花开的时间
3楼2013-10-30 00:24:44
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 落于忘川 at 2013-10-30 00:24:44
我是想既测SOD清除超氧自由基的效果，又测清除DPPH的效果，这样应该可以吧...

那可以用ABTS自由基，效果和DPPH基本一样，反应是在水溶液中进行
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4楼2013-10-30 19:25:45
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落于忘川

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2013-10-30 19:25:45
那可以用ABTS自由基，效果和DPPH基本一样，反应是在水溶液中进行...

如果用DPPH的话，测分光是用醇溶液调零吗
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5楼2013-10-31 11:46:24
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 落于忘川 at 2013-10-31 11:46:24
如果用DPPH的话，测分光是用醇溶液调零吗...

可以。
清除能力=（样品+DPPH醇溶液）-（样品+醇）
还是想说一句，SOD做DPPH实在是太别扭了
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6楼2013-10-31 18:37:47
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lovelantian

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2013-10-31 18:37:47
可以。
清除能力=（样品+DPPH醇溶液）-（样品+醇）
还是想说一句，SOD做DPPH实在是太别扭了...

您好，我最近在做黄酮的抗氧化实验，也是做DPPH的清除率。
我看的文献上，空白（样品加乙醇）对照是（水加DPPH加乙醇）
样品是（样液加DPPH加乙醇）。清除率=1-（样品-空白）/对照
我想问问，我调零的参比是用纯乙醇吗？我之前一直是用的（乙醇加DPPH），测的吸光度都是负数，我想请教一下是不是我的参比做错了
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7楼2015-02-04 13:00:05
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齐宝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by lovelantian at 2015-02-04 13:00:05
您好，我最近在做黄酮的抗氧化实验，也是做DPPH的清除率。
我看的文献上，空白（样品加乙醇）对照是（水加DPPH加乙醇）
样品是（样液加DPPH加乙醇）。清除率=1-（样品-空白）/对照
我想问问，我调零的参比是用纯 ...

应该是用醇溶液调零就可以，然后按照公式计算，不过好像有的用甲醇、有的是用98%还是95%的乙醇。
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8楼2015-05-23 22:00:12
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