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宝宝1986

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】邻二氮菲测清除羟基自由基的能力 已有10人参与

我要测一种物质的清除羟基自由基的能力,采用的是邻二氮菲法 ,但是加入样品,37摄氏度保温1h后,出现了絮状沉淀!!!!!!!取上清液测吸光度跟摇匀后测吸光度差别很大,而不加样品的对照组却没有出现絮状沉淀。,请问一下这是怎么回事?急急急~谢谢
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ockeyze

铜虫 (小有名气)

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树树8013(金币+2):谢谢ockeyze虫友的解答,欢迎常来食品板块 2010-12-15 22:16:17
邻二氮菲法我觉得太复杂了,用Fe2+——水杨酸法吧,步骤很简单的,恰好我今天也做了羟基自由基的清楚试验,试验结果较理想,水浴也不过10min钟就OK了,试样的浓度最好先控制在0~1.0mg/mL之间试试,做这些都是要自己慢慢摸索的,祝你好运!
6楼2010-12-15 21:59:14
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huangxing45

金虫 (正式写手)

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树树8013(金币+1):谢谢huangxing45虫友的解答 2010-12-10 16:22:12
我做的时候也是出现了这种情况。我的解释是,我的样品中酚类物质比较多,酚类物质跟反应中产生的三价铁离子产生了黑色的絮状物。
2楼2010-12-10 16:20:01
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huangxing45

金虫 (正式写手)


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我当时做了几个样品,其中酚类较高的出现了絮状物,做的数据也不可信。
3楼2010-12-10 16:27:07
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普通回帖

柚柚海风

金虫 (正式写手)


lovibond(金币+1):鼓励交流 2010-12-11 22:23:14
我们都是水浴后离心,然后再测得,邻二氮菲法好像不是很好,有钱的话就用DPPH或者FRAP法测总抗氧化能力吧。
4楼2010-12-11 22:21:19
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ockeyze

铜虫 (小有名气)

★ ★
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树树8013(金币+1):谢谢ockeyze虫友根据自己实验经验做出的解答,欢迎常来食品板块 2010-12-12 18:29:54
把浓度降低点再试试看,我做NO2-基的时候也出现这种情况,浓度大的时候显色是产生了很多沉淀使得无法读数,但把浓度降低了之后就可以读数了。
5楼2010-12-12 17:53:11
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宝宝1986

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by huangxing45 at 2010-12-10 16:20:01:
我做的时候也是出现了这种情况。我的解释是,我的样品中酚类物质比较多,酚类物质跟反应中产生的三价铁离子产生了黑色的絮状物。

是的,我测得就是酚类,低浓度的时候不会出现絮状沉淀,但高浓度的就会,我想问一下,出现絮状沉淀后测的数据还准不准?
7楼2010-12-22 14:31:05
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宝宝1986

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by huangxing45 at 2010-12-10 16:27:07:
我当时做了几个样品,其中酚类较高的出现了絮状物,做的数据也不可信。

昂,我做的就说酚类物质 ,浓度高了就会出现絮状物,但是震荡一下,絮状物就没有了,你觉得这样测的数据不可信吗?
8楼2010-12-22 14:32:45
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huangxing45

金虫 (正式写手)


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我也不怎么清楚。建议离心下,再测吸光度,看结果正常不。
9楼2010-12-22 18:16:27
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tyichao111

木虫 (初入文坛)

★ ★
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树树8013(金币+1):谢谢tyichao111的经验解答,欢迎、欢迎 2010-12-22 22:05:36
我当时做的时候高浓度会出现这种状况,如果降低一下浓度会没事了,我觉了摇匀要比离心好吧!每个样品都摇匀,在同一的条件下,应该有什么影响吧!不过还是建议降低下浓度试试看。
学习
10楼2010-12-22 21:45:43
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