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【求助】药食两用植物的提取物的羟基自由清楚率测定问题，大侠进来帮帮
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测定提取物的抗氧化性，正在测定其中羟基自由基，采用水杨酸法测定，用紫外来测定反应后的吸光值。根据文献方法，按步骤来做，多次实验，同样浓度的物质，每次做出的吸光度差距很大，甚至结果除负的清除率。即使是空白样，吸光度测出来也有较大的差距。试剂已经检查清楚，硫酸亚铁，水杨酸都是现配的。步骤顺序，1.样品2.硫酸亚铁3.水杨酸4.双氧水。样品浓度为1mol/ml,硫酸亚铁为9mmol/l,水杨酸为9mol/l,双氧水为0.03%。水浴37度反应30分钟，吸光度在510NM下测定。 我不知道还有哪些细节没做到。。。求教啊  我都白做了2个月了，有7个样品，每做次实验就要花费半天，但还是没有实质性进展。有些样品测定出有清除率的，但是下一次就又变负的了。无语。。。 |
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我想问下你的提取物中主要有哪些成分，是不是多酚类？ 我最近也是用水杨酸法做的，方法如下：1ml 1.5mMFeSO4, 0.7ml6mMH2O2,0.3ml 20mM水杨酸，1ml 样品，37度水浴1小时，562nm测吸光值。做的效果还行。 我之前也是纠结了2星期，后来放弃。不是所有的方法体系都适合你的样品，所以做不出来的时候就换其它的方法，毕竟抗氧化的方法很多。 |
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2011-03-18 15:03
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