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CAT吸光度值上升
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| 按理论CAT吸光度值应该会下降，但我的CAt值不稳定，而且有的会不断上升，是哪出问题了，请大侠赐教！ |
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starseacow
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
jhu132llh: 金币+3, 感谢积极应助 2012-04-01 20:25:39
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jhu132llh: 金币+3, 感谢积极应助 2012-04-01 20:25:39
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首先确认一下，楼主是用紫外吸收法检测H2O2分解造成的A240 nm变化吧？ 我的方法如下 取0.1 ml待测酶液，加入0.05 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液1.4 ml，40 mmol/l H2O2 1.5 ml，立即计时，测定波长240 nm处吸光度值，每隔30 s读数一次，共测定4 min。以不含酶待测液作为空白对照。CAT活力以ΔA240/Δt=0.001/min为一个酶活力单位（U），比活力为U/mg蛋白。 在我实验过程中也曾碰到240 nm吸光度不降反升，解决这个问题有这么几个因素要考虑 1 保证所使用的试剂都没有问题，H2O2一定要现用现配 2 有时候提取的样品中CAT含量似乎有差别，最好选择一个合适的样品量，在我的试验中有时候0.1 ml待测酶液做不出结果，换成0.2 ml就有很大改观。 3 观察观察只加待测酶液或只加H2O2的对照组吸光度变化情况，有时候由于样品或试剂污染，存在一些可能在240 nm有吸收的物质，会严重干扰测定 |
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baiyongxia
2楼2012-03-30 22:41:46
gymylove
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十分感谢，我先试试哈 4楼2012-04-01 09:41:37
jhu132llh
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