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hero_wang

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】药食两用植物的提取物的羟基自由清楚率测定问题，大侠进来帮帮

测定提取物的抗氧化性，正在测定其中羟基自由基，采用水杨酸法测定，用紫外来测定反应后的吸光值。根据文献方法，按步骤来做，多次实验，同样浓度的物质，每次做出的吸光度差距很大，甚至结果除负的清除率。即使是空白样，吸光度测出来也有较大的差距。试剂已经检查清楚，硫酸亚铁，水杨酸都是现配的。步骤顺序，1.样品2.硫酸亚铁3.水杨酸4.双氧水。样品浓度为1mol/ml,硫酸亚铁为9mmol/l,水杨酸为9mol/l,双氧水为0.03%。水浴37度反应30分钟，吸光度在510NM下测定。
   我不知道还有哪些细节没做到。。。求教啊
   我都白做了2个月了，有7个样品，每做次实验就要花费半天，但还是没有实质性进展。有些样品测定出有清除率的，但是下一次就又变负的了。无语。。。
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1楼 2011-03-18 10:17:14
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hero_wang

银虫 (初入文坛)
不知道的也顶下，凑点人气啊
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2楼2011-03-18 13:45:44
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anjinghebust

至尊木虫 (知名作家)
★
hero_wang(金币+1):谢谢参与
结果与仪器条件也有关系。我们有时也遇到这种情况！
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3楼2011-03-18 14:34:51
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huangxing45

金虫 (正式写手)
★ ★
hero_wang(金币+1):谢谢参与
树树8013(金币+1): 继续金币奖励，欢迎常来参与回帖、发帖。 2011-03-19 09:07:50
hero_wang(金币+2): 2011-03-19 11:57:01
我想问下你的提取物中主要有哪些成分，是不是多酚类？
我最近也是用水杨酸法做的，方法如下：1ml 1.5mMFeSO4, 0.7ml6mMH2O2,0.3ml 20mM水杨酸，1ml 样品，37度水浴1小时，562nm测吸光值。做的效果还行。
我之前也是纠结了2星期，后来放弃。不是所有的方法体系都适合你的样品，所以做不出来的时候就换其它的方法，毕竟抗氧化的方法很多。
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5楼2011-03-19 08:36:51
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)
★
hero_wang(金币+1):谢谢参与
你这个样品不适合做羟基自由基，可以考虑换个体系，如超氧自由基、DPPH等
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6楼2011-03-19 09:23:49
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hero_wang

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by mwy_jeyp at 2011-03-18 15:03:04:

样品没有经过液相，文献查阅是有黄酮类化合物，打算做的是比较全面的抗氧化测定，DPPH，OH,还原力，抗脂化也做的，以前用过邻二氮菲法，效果也不理想，实验室常规设备就是紫外，没有荧光分析仪，所以就一直用紫外分光分度法莱测定。
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7楼2011-03-19 11:54:55
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huangxing45

金虫 (正式写手)
hero_wang(金币+2): 2011-03-19 19:59:45
还可以做下还原能力，金属离子螯合能力
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8楼2011-03-19 13:46:08
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jjwl_rscn

金虫 (正式写手)
★
hero_wang(金币+1):谢谢参与
打酱油的
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9楼2011-03-19 16:09:20
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hero_wang

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hero_wang at 2011-03-19 11:54:55:
样品没有经过液相，文献查阅是有黄酮类化合物，打算做的是比较全面的抗氧化测定，DPPH，OH,还原力，抗脂化也做的，以前用过邻二氮菲法，效果也不理想，实验室常规设备就是紫外，没有荧光分析仪，所以就一直用紫 ...

下星期开始做还原力吧，羟基自由基不知道如何是好，不知道加入稳定剂是不是会好点
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10楼2011-03-19 20:05:07
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zzqbaidu

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问是咋解决的啊 我的经常也是负值。。。
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11楼2012-09-19 18:07:55
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mwy_jeyp4楼
2011-03-18 15:03   回复  
hero_wang(金币+1):谢谢参与
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