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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 连接转化，蓝斑非常多，什么原因
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douxx

新虫 (小有名气)

[求助] 连接转化，蓝斑非常多，什么原因 已有2人参与

最近做连接转化，涂板子后绝大多数都是篮板，白斑极少。
这是什么原因？有谁遇到过相同的情况么？
载体：pEASY-Blunt simple
感受态：Trans T1
片段如图：
连接转化，蓝斑非常多，什么原因
图片1.png

[ Last edited by silicare on 2014-3-5 at 09:26 ]
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1楼 2014-02-28 16:22:09
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
这是你的目的片段吗？你切下哪一条带跟你的载体连接呢？
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
2楼2014-02-28 16:30:12
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douxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-28 16:30:12
这是你的目的片段吗？你切下哪一条带跟你的载体连接呢？

这两个片段都是正常大小，所以直接转了都
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3楼2014-02-28 16:33:03
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by douxx at 2014-02-28 16:33:03
这两个片段都是正常大小，所以直接转了都...

你是分别切胶回收的么？
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-02-28 16:37:11
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douxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-28 16:37:11
你是分别切胶回收的么？...

这就是胶回收后的条带，回收后直接转化
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5楼2014-02-28 16:38:55
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
douxx(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:14:34
连接效率低，blunt载体不容易连接。只要有连上的jiuOK
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hehe
6楼2014-02-28 16:40:28
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douxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-28 16:37:11
你是分别切胶回收的么？...

这个是筛选的结果
连接转化，蓝斑非常多，什么原因-1
Untitled6 - 副本_美图 - 副本.jpg
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7楼2014-02-28 16:40:47
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douxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-02-28 16:40:28
连接效率低，blunt载体不容易连接。只要有连上的jiuOK

这是挑的白斑，做的筛选。
假阳性也非常多
连接转化，蓝斑非常多，什么原因-2
Untitled6 - 副本_美图 - 副本.jpg
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8楼2014-02-28 16:42:56
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by douxx at 2014-02-28 16:40:47
这个是筛选的结果

Untitled6 - 副本_美图 - 副本.jpg
...

只能说连接效率低，换个载体试试
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
9楼2014-02-28 19:52:23
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三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
douxx(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-02-28 21:42:02
全式金的pEASY挺好用，蓝斑很多就是连接效率低或者出现很多载体自连情况，试着优化每一步。或者问问用过这个载体的人，看看这个载体的效率如何。
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我不会！
10楼2014-02-28 20:26:55
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