应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求帮助设计引物啊？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1325  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

[求助] 求帮助设计引物啊？ 已有3人参与

各位做分子的大神，我想克隆一段基因，自己设计的引物一直P不出来，求大神帮助设计一对合适的啊，前后所加酶切位点分别是Bamh1、EcorR1。

序列（2235bp）是这样的：
ATGGCGAAGCAAAAAATTAAAATTAAAAAAAATAAAATAGGGGCAGTCCTACTTGTTGGTTTATTCGGACTGCTCTTTTTTATATTGGTTTTAAGAATTTCATATATCATGATTACTGGACATTCTAATGGTCAAGATTTAGTCATGAAGGCAAATGAAAAGTATTTAGTTAAGAATGCACAACAACCAGAACGAGGAAAGATATATGATCGTAATGGTAAAGTGCTAGCAGAAGATGTAGAAAGATATAAACTTGTTGCAGTAATAGATAAAAAGGCGAGTGCCAATTCTAAAAAACCTAGGCATGTAGTTGATAAAAAAGAGACTGCAAAGAAATTATCTACAGTCATTGATATGAAGCCAGAGGAAATTGAAAAGAGACTTAGTCAAAAGAAAGCCTTCCAAATTGAATTTGGACGCAAAGGAACAAATTTAACGTATCAGGACAAATTGAAAATAGAGAAAATGAATTTGCCTGGTATTTCTTTATTGCCTGAAACAGAACGCTTTTATCCAAATGGCAATTTTGCATCACACTTAATTGGTAGAGCTCAGAAAAATCCGGATACTGGTGAACTTAAAGGTGCGCTTGGGGTTGAAAAGATTTTTGATAGTTATTTAAGTGGATCTAAAGGATCATTGAGATATATTCATGATATTTGGGGATATATTGCACCAAATACTAAAAAAGAGAAGCAGCCTAAACGTGGTGATGATGTCCATTTAACAATCGATTCAAATATTCAAGTATTTGTTGAAGAAGCTTTAGATGGCATGGTTGAAAGATACCAGCCGAAAGATTTATTTGCGGTTGTCATGGATGCCAAAACTGGAGAAATTTTAGCATACAGTCAGCGACCAACATTTAATCCTGAAACTGGTAAAGACTTTGGTAAAAAGTGGGCAAATGACCTTTATCAAAACACATACGAGCCTGGATCAACATTTAAATCATATGGGTTAGCAGCTGCTATTCAAGAAGGTGCTTTTGATCCTGATAAGAAATATAAATCTGGACATAGAGATATTATGGGTTCACGTATTTCAGACTGGAATAGAGTCGGTTGGGGTGAAATCCCAATGTCACTCGGATTTACTTATTCATCTAATACATTGATGATGCATTTACAAGATTTAGTTGGTGCAGACAAAATGAAATCTTGGTATGAACGATTTGGATTTGGAAAATCAACTAAAGGTATGTTTGATGGAGAAGCACCTGGTCAAATTGGATGGAGTAATGAGTTGCAACAAAAAACGTCATCATTTGGTCAATCGACAACAGTAACACCTGTTCAAATGTTACAAGCGCAATCAGCGTTCTTTAATGATGGTAATATGTTAAAACCATGGTTTGTGAATAGCGTTGAAAATCCTGTTAGTAAAAGACAATTTTATAAAGGTCAAAAACAAATCGCAGGCAAACCAATAACAAAAGATACTGCTGAAAAAGTTGAAAAGCAATTGGATTTAGTTGTGAATAGTAAGAAGAGTCACGCTGCAAACTATCGTATTGATGGTTATGAGGTCGAAGGTAAGACTGGTACAGCACAAGTCGCTGCACCTAATGGTGGTGGATACGTTAAAGGTCCAAACCCATATTTTGTAAGTTTTATGGGTGACGCGCCGAAGAAAAATCCTAAAGTTATTGTATACGCTGGTATGAGCTTGGCACAAAAAAATGACCAAGAAGCTTATGAATTAGGTGTTAGTAAAGCGTTTAAACCAATAATGGAAAATACTTTGAAATATTTAAATGTAGGTAAATCAAAAGATGACACATCTAATGCAGAGTATAGTAAAGTGCCAGATGTTGAAGGTCAAGACAAACAAAAAGCTATTGATAATGTGAGTGCAAAATCATTAGAACCAGTTACTATCGGTTCTGGCACACAAATAAAAGCGCAATCTATAAAAGCAGGGAATAAAGTCTTACCTCATAGTAAAGTACTGTTATTAACAGATGGAGACTTAACTATGCCTGACATGTCAGGATGGACGAAAGAAGATGTCATTGCTTTTGAAAACCTAACAAATATTAAAGTAAATTTAAAAGGTAGCGGTTTTGTGTCCCACCAATCAATTAGTAAGGGACAAAAACTTACTGAAAAAGATAAAATAGACGTAGAATTTTCATCAGAGAATGTAGACAGCAATTCGACGAATAATTCTGATTCAAATTCAGATGATAAGAAGAAATCTGACAGTAAAACTGACAAGGATAAGTCGGACTAA
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-27 21:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaolong11a

新虫 (小有名气)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-28 11:45:53
引用回帖:
5楼: Originally posted by windleakey at 2014-02-28 09:08:27
谢谢回复，保护碱基+酶切位点+序列=39这样吗？
按照一般的引物设计原则，39感觉很大呢...

对，我们只有在扩增基因时这样做。39个基因中光酶切位点就占10来个，如果靶位点序列太少的话，会结合不稳。你先试试吧。不过你这个A确实多，不知有影响吗
赞一下 回复此楼
多情总被无情扰。。。愁
7楼2014-02-28 11:23:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-28 11:45:42
这是短阅码框，别无选择啰，直接在5‘端家酶切位点就是了。只不过基因有点大，走cDNA因此有点难吧了。
赞一下 回复此楼
2楼2014-02-28 00:07:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forrestgump at 2014-02-28 00:07:56
这是短阅码框，别无选择啰，直接在5‘端家酶切位点就是了。只不过基因有点大，走cDNA因此有点难吧了。

请问前后该截多长呢？特别是前面重复A这部分，不知道该怎么办。请问除了c DNA还有别的什么方法吗？
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-28 08:44:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-28 11:45:47
我们一般都是直接取头尾各加上酶切位点共39个碱基，都能扩出来
赞一下 回复此楼
多情总被无情扰。。。愁
4楼2014-02-28 08:58:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 348求调剂 +10 zzzzyk123 2026-04-01 10/500 2026-04-02 16:04 by 中飞院空管学院�
[考研] 336求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:51 by Jaylen.
[考研] 309求调剂 +8 呆菇不是戴夫 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:30 by oooqiao
[考研] 085601一志愿中山大学深圳材料工程330求调剂 +8 pipiver 2026-03-30 8/400 2026-04-02 12:01 by ms629
[考研] 289求调剂 +23 新时代材料 2026-03-27 26/1300 2026-04-02 10:29 by oooqiao
[考研] 324分 085600材料与化工 +20 呆鹅oor 2026-03-27 20/1000 2026-04-02 10:13 by oooqiao
[考研] 重庆大学材料与化工085600，初试370+，求求调剂建议 +5 shzhou_ 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:05 by olim
[考研] 274求调剂 +8 薛定谔的虎。 2026-04-01 8/400 2026-04-02 09:21 by 晴空210210
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-01 21:48 by chyhaha
[考研] 085600，320分求调剂 +5 大馋小子 2026-04-01 6/300 2026-04-01 19:40 by 唐沐儿
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 254材料与化工求调剂 +3 翰冬林楠 2026-03-30 4/200 2026-03-31 17:53 by yishunmin
[考研] 318求调剂 +10 陈晨79 2026-03-30 10/500 2026-03-31 17:37 by 544594351
[考研] 一志愿西电085401数一英一299求调剂 六级521 +4 爱吃大鸭梨 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:51 by 搏击518
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 312，生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭