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各位高手： 我是想把一段序列从PCANTAB5E上换到pet26b上，但是在菌落pcr验证这一步，结果始终是不对，电泳结果是在100bp那出现弥散性条带。 我是这样做的：1.扩增出目的片段 2.目的片段与pet26b的双酶切 3.连接 4.转化到JM109，涂板， 5.挑克隆，pcr（程序和体系与第一步的相同） 结果如上述 我今天又重新提了一次pet26b的质粒，同时提了第四步涂得平板的单菌落的质粒，结果如图：发现重组质粒比原始质粒大了将近1500bp，我的目的片段大约是750bp 大家知不知道这是什么原因啊啊啊啊啊 愁死我了 我都做了4遍了  AAXUUANVOK}CGJ]90S[3)88.jpg |
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