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TRIzol提取细胞总RNA,为何只有处理组没有结果? 已有1人参与
最近一直在用Invitrogen公司的TRIzol提取细胞的总RNA,在跑电泳时,空白对照出现了3条亮带,其中28S的是18S的两倍宽,亮度清晰。而我的两个处理组只是在5S的位置有很浅的弥散带。不知怎么回事?
1、采用的6孔板培养贴壁细胞,6孔板接种的细胞量都是相同的,一个细胞培养瓶里面出来的。2个孔用1mL TRIzol处理,获得1个空白对照管,2个处理管。
2、3个管RNA提取条件完全相同,同时做的。
3、在用异丙醇沉淀后,对照管明显能看出有沉淀,而2个处理管底部沉淀很难看出,即便是有的话也非常少。
提了几次RNA了,都出现了3中说的情况,对照沉淀多,处理组沉淀少或看不到的情况,这是为什么呢?
电泳图如下:
第1张图是之前提的结果,左边的为空白对照,右边的是处理组,图中可知,RNA都出现明显降解,处理组更为严重。
有人建议提高细胞浓度试试,第2张图是刚刚提的结果,在细胞浓度上有所提高。第1泳道为空白对照,2、3泳道分别是处理组1和2。
对照组和处理组为何出现如此差异?
烦请高人指点!!!多谢啦!!!
![TRIzol提取细胞总RNA,为何只有处理组没有结果?]()
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![TRIzol提取细胞总RNA,为何只有处理组没有结果?-1]()
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[ Last edited by Probiotics on 2014-1-7 at 21:24 ] |
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