24小时热门版块排行榜    

查看: 2463  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小睿D

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质标准曲线的测定的细节 已有2人参与

各位虫友,小弟最近在做蛋白质标准曲线,但一直都做不出来,先是在595nm处出现-0.604的吸收值,还有-0.452,而且不会随蛋白质的浓度升高而吸光度变大,做光谱扫描的时候也没见在595处有吸收峰,我的实验是按网上搜到的来做的,就是做的细节可能有些和大家不同,想看看已经做出的虫友做的时候是怎么样?是不是我做错了?我觉得有问题的地方有:
1、考马斯亮蓝G-250配制的时候,在定容完后进行过滤,得到的滤液直接放入塑料瓶中,然后放入冰箱中4-5℃保存。
2、在做紫外分光光度的时候,我用塑料比色皿来做,每个样都用一个新的比色皿,没有润洗(比色皿都是一次性用)。
想了解一下大家的实验步骤是怎么样的?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小睿D

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by cyc000 at 2014-01-10 19:33:33
不好意思,是19比1,之前的那个记错了!

非常感谢,那段时间又进行了不同的尝试,结果发现是考马斯亮蓝出问题,西亚公司的G250不知道是包装错了还是怎么的,我们后来换了阿拉丁的就没事了,没能及时给您回复,真的很抱歉!再次感谢您!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-07-18 01:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

cyc000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2014-01-10 20:27:30
小睿D(红舟流星代发): 金币+6, 代扣代发金币 2014-04-18 09:01:26
把已知蛋白浓度逐级稀释,取0.1~0.5mg/mL的值,再大的值误差很大,出现下降趋势,G250和蛋白溶液的浓度比我用的是体积比20比1.
2楼2014-01-10 19:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyc000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不好意思,是19比1,之前的那个记错了!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-01-10 19:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2014-01-15 21:24:01
小睿D(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2014-04-18 09:01:17
是不是你溶解牛血清蛋白的缓冲液里某些物质和G250反应了啊。G250不只是和蛋白反应显蓝色,和别的一些物质某些表面活性剂也反应显色的
4楼2014-01-15 11:16:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 12/600 2026-08-12 01:27 by 南京中西医
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见