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小睿D

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质标准曲线的测定的细节已有2人参与

各位虫友,小弟最近在做蛋白质标准曲线,但一直都做不出来,先是在595nm处出现-0.604的吸收值,还有-0.452,而且不会随蛋白质的浓度升高而吸光度变大,做光谱扫描的时候也没见在595处有吸收峰,我的实验是按网上搜到的来做的,就是做的细节可能有些和大家不同,想看看已经做出的虫友做的时候是怎么样?是不是我做错了?我觉得有问题的地方有:
1、考马斯亮蓝G-250配制的时候,在定容完后进行过滤,得到的滤液直接放入塑料瓶中,然后放入冰箱中4-5℃保存。
2、在做紫外分光光度的时候,我用塑料比色皿来做,每个样都用一个新的比色皿,没有润洗(比色皿都是一次性用)。
想了解一下大家的实验步骤是怎么样的?
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2014-01-15 21:24:01
小睿D(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2014-04-18 09:01:17
是不是你溶解牛血清蛋白的缓冲液里某些物质和G250反应了啊。G250不只是和蛋白反应显蓝色,和别的一些物质某些表面活性剂也反应显色的
4楼2014-01-15 11:16:16
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