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Bradford法定量蛋白质 已有2人参与
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| 请问大家，谁经常用Bradford法定量蛋白呀，我定了几次蛋白，标准曲线的R2老是达不到三个9，每次只能达到1个9，请各位给我提供下用此方法定量的详细步骤吧，越详细越好，如从试剂配制开始。要是有完整的protocal的话，就更好了。还有决定实验成败的注意事项有哪些呢，谢谢。 |
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【答案】应助回帖
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大神，请问考马斯亮蓝G250能测尿液里的总蛋白吗？想用考马斯亮蓝G250测尿液里的蛋白浓度，然后乘以尿量，得出尿液里一共多少蛋白。这个办法可行吗？请大神指点谢谢大神 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-04-24 11:17:51
fuyuandj86
版主 (著名写手)
己所不欲，勿施于人
- 应助: 397 (硕士)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-01-04 00:28:40
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尽量按照说明书在规定的线性范围内做标准曲线, 和Bradford的染料反应后要统一等5分钟,等颜色稳定下来再测,但是不要等的时间太长 不过话又说回来, 标准曲线R2达不到3个9又不碍事,我Bradford标准曲线从来都到不了那么好的线性 这个Bradford定量浓度本来就有误差, 他的显色机制和你氨基酸的组成有关,如果你的蛋白里Arg,Trp,Phe,Pro比较多,那他颜色就会显得更深. 结果就是你用不同的蛋白做标准曲线都会有差别, 标准曲线搞那么精细完全没必要,凑合能用就行了 |
2楼2014-01-03 23:17:31
3楼2014-01-05 23:29:26
