应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Bradford法定量蛋白质
51/1返回列表
查看: 858  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

GracePoppy

新虫 (初入文坛)

[求助] Bradford法定量蛋白质 已有2人参与

请问大家，谁经常用Bradford法定量蛋白呀，我定了几次蛋白，标准曲线的R2老是达不到三个9，每次只能达到1个9，请各位给我提供下用此方法定量的详细步骤吧，越详细越好，如从试剂配制开始。要是有完整的protocal的话，就更好了。还有决定实验成败的注意事项有哪些呢，谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-03 19:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GracePoppy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-01-03 23:17:31
尽量按照说明书在规定的线性范围内做标准曲线, 和Bradford的染料反应后要统一等5分钟,等颜色稳定下来再测,但是不要等的时间太长
不过话又说回来, 标准曲线R2达不到3个9又不碍事,我Bradford标准曲线从来都到不了那么 ...

恩恩，谢谢。今天我又做了一次，达到了0.9988.这个结果还算满意吧
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-05 23:29:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-01-04 00:28:40
尽量按照说明书在规定的线性范围内做标准曲线, 和Bradford的染料反应后要统一等5分钟,等颜色稳定下来再测,但是不要等的时间太长
不过话又说回来, 标准曲线R2达不到3个9又不碍事,我Bradford标准曲线从来都到不了那么好的线性
这个Bradford定量浓度本来就有误差, 他的显色机制和你氨基酸的组成有关,如果你的蛋白里Arg,Trp,Phe,Pro比较多,那他颜色就会显得更深. 结果就是你用不同的蛋白做标准曲线都会有差别, 标准曲线搞那么精细完全没必要,凑合能用就行了
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-01-03 23:17:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1769935

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-01-03 23:17:31
尽量按照说明书在规定的线性范围内做标准曲线, 和Bradford的染料反应后要统一等5分钟,等颜色稳定下来再测,但是不要等的时间太长
不过话又说回来, 标准曲线R2达不到3个9又不碍事,我Bradford标准曲线从来都到不了那么 ...

大神，请问考马斯亮蓝G250能测尿液里的总蛋白吗？想用考马斯亮蓝G250测尿液里的蛋白浓度，然后乘以尿量，得出尿液里一共多少蛋白。这个办法可行吗？请大神指点谢谢大神

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-04-24 11:17:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭