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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR琼脂糖凝胶小片段处模糊
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小宝在学习

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR琼脂糖凝胶小片段处模糊 已有3人参与

求助，之前做的多重PCR，跑胶时低分子量处条带很模糊，用50bpmarker，50-100处有条带，但都模糊分辨不清。大分子处还可以，想问问有什么解决方法吗？我又7条带，用4%的胶跑的，辛苦，谢谢了，照片是tiff格式，无法上传，如有意向帮忙，再联系
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1楼 2013-12-21 16:37:09
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-21 22:03:54
这种建议跑SDS-PAGE，国产的琼脂糖不能分辨这种小条带的。
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2楼2013-12-21 21:57:01
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意楼上，建议不要用质量低的琼脂糖。
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学习使你立于不败之地
3楼2013-12-21 22:09:27
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小宝在学习

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-12-21 21:57:01
这种建议跑SDS-PAGE，国产的琼脂糖不能分辨这种小条带的。

我们用的是biowest，传说中西班牙进口，SDS-PAGE胶的分辨效果好吗？
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4楼2013-12-21 22:18:34
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小宝在学习

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-12-21 21:57:01
这种建议跑SDS-PAGE，国产的琼脂糖不能分辨这种小条带的。

我还想问一下，我一共有190,141,104,85,80,74,66七条带，想问一下我应该用多大浓度的PAGE胶呢？谢谢啦，非常感谢
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5楼2013-12-21 22:35:59
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重要一刻

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-14 08:34:48
电泳电压不能太高60V-70V，电泳时间20-25分钟，电泳缓冲液位0.5%TBE
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6楼2014-01-13 16:02:06
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