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小宝在学习

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR琼脂糖凝胶小片段处模糊 已有3人参与

求助,之前做的多重PCR,跑胶时低分子量处条带很模糊,用50bpmarker,50-100处有条带,但都模糊分辨不清。大分子处还可以,想问问有什么解决方法吗?我又7条带,用4%的胶跑的,辛苦,谢谢了,照片是tiff格式,无法上传,如有意向帮忙,再联系
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-21 22:03:54
这种建议跑SDS-PAGE,国产的琼脂糖不能分辨这种小条带的。
2楼2013-12-21 21:57:01
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意楼上,建议不要用质量低的琼脂糖。
学习使你立于不败之地
3楼2013-12-21 22:09:27
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小宝在学习

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-12-21 21:57:01
这种建议跑SDS-PAGE,国产的琼脂糖不能分辨这种小条带的。

我们用的是biowest,传说中西班牙进口,SDS-PAGE胶的分辨效果好吗?
4楼2013-12-21 22:18:34
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小宝在学习

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-12-21 21:57:01
这种建议跑SDS-PAGE,国产的琼脂糖不能分辨这种小条带的。

我还想问一下,我一共有190,141,104,85,80,74,66七条带,想问一下我应该用多大浓度的PAGE胶呢?谢谢啦,非常感谢
5楼2013-12-21 22:35:59
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重要一刻

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-14 08:34:48
电泳电压不能太高60V-70V,电泳时间20-25分钟,电泳缓冲液位0.5%TBE
6楼2014-01-13 16:02:06
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