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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » C18柱用的时间太长，柱压太高，怎么处理？
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yyall

铜虫 (小有名气)

[求助] C18柱用的时间太长，柱压太高，怎么处理？ 已有1人参与

C18柱用的时间太长，用过的缓冲盐太多，柱压太高，分离效果不是很好，很多小的杂质都挤到一块，并且主峰拖尾很严重，怎么处理？
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做最仔细的分析工作，用细致甚微弥补学历不足
1楼 2013-12-20 09:57:51
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yjlrx

金虫 (小有名气)
我觉得也可能是样品不干净或者买的缓冲盐级别不够，倒是可以在前面加一短的保护预柱，可以保护色谱柱，还能得到更稳定的基线，但是死体积会增加，不知会不会影响你的杂质分离。
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4楼2013-12-22 14:09:49
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ivlovemoon

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yyall: 金币+2, ★有帮助 2013-12-20 12:01:17
yyall: 金币+3, ★有帮助, 色谱柱再生 2013-12-20 12:04:33
这个得看你的柱子是被什么污染的，也就是看你最近经常进什么，杂质一般是什么，针对性采用极性不用的流动相冲洗。
如果是长期使用的累积污染
一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来，每次用30-50柱体积的流动相冲，或者直接冲个30min
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%正己烷
然后再反顺序变流动相冲回来
一定要注意，正己烷和乙腈等不能互溶，所以中间有异丙醇二氯甲烷过渡，二氯甲烷和水亦然，不要直接用大极性的，会不互溶
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2楼2013-12-20 11:13:05
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yyall

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ivlovemoon at 2013-12-20 11:13:05
这个得看你的柱子是被什么污染的，也就是看你最近经常进什么，杂质一般是什么，针对性采用极性不用的流动相冲洗。
如果是长期使用的累积污染
一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来，每次用30-50 ...

我这边是累计使用造成的，基本上天天用10%甲醇水1.0ml/min冲洗30min,50%乙腈水或者90%乙腈水0.3ml/min冲洗过夜。异丙醇和二氯甲烷没有直接冲过，一般是进两到三针。
还有是不是我的色谱柱使用时间太久了，已经到极限了。初步估算已经进过3600针样了。
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做最仔细的分析工作，用细致甚微弥补学历不足
3楼2013-12-20 12:00:32
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贾超斌

新虫 (初入文坛)
3600多针……柱压升高，用30%甲醇四十五度冲洗两个小时，应该可以解决。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-12-22 23:20:35
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