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yyall

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[求助] C18柱用的时间太长，柱压太高，怎么处理？已有1人参与

C18柱用的时间太长，用过的缓冲盐太多，柱压太高，分离效果不是很好，很多小的杂质都挤到一块，并且主峰拖尾很严重，怎么处理？

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1楼 2013-12-20 09:57:51

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yjlrx

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我觉得也可能是样品不干净或者买的缓冲盐级别不够，倒是可以在前面加一短的保护预柱，可以保护色谱柱，还能得到更稳定的基线，但是死体积会增加，不知会不会影响你的杂质分离。

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4楼2013-12-22 14:09:49

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ivlovemoon

银虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yyall: 金币+2, ★有帮助 2013-12-20 12:01:17
yyall: 金币+3, ★有帮助, 色谱柱再生 2013-12-20 12:04:33

这个得看你的柱子是被什么污染的，也就是看你最近经常进什么，杂质一般是什么，针对性采用极性不用的流动相冲洗。
如果是长期使用的累积污染
一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来，每次用30-50柱体积的流动相冲，或者直接冲个30min
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%正己烷
然后再反顺序变流动相冲回来
一定要注意，正己烷和乙腈等不能互溶，所以中间有异丙醇二氯甲烷过渡，二氯甲烷和水亦然，不要直接用大极性的，会不互溶

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2楼2013-12-20 11:13:05

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yyall

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引用回帖:

2楼: Originally posted by ivlovemoon at 2013-12-20 11:13:05
这个得看你的柱子是被什么污染的，也就是看你最近经常进什么，杂质一般是什么，针对性采用极性不用的流动相冲洗。
如果是长期使用的累积污染
一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来，每次用30-50 ...