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yyall铜虫 (小有名气)
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C18柱用的时间太长，柱压太高，怎么处理？ 已有1人参与
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| C18柱用的时间太长，用过的缓冲盐太多，柱压太高，分离效果不是很好，很多小的杂质都挤到一块，并且主峰拖尾很严重，怎么处理？ |
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4楼2013-12-22 14:09:49
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yyall: 金币+2, ★有帮助 2013-12-20 12:01:17
yyall: 金币+3, ★有帮助, 色谱柱再生 2013-12-20 12:04:33
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这个得看你的柱子是被什么污染的，也就是看你最近经常进什么，杂质一般是什么，针对性采用极性不用的流动相冲洗。 如果是长期使用的累积污染 一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来，每次用30-50柱体积的流动相冲，或者直接冲个30min 水/乙腈95/5 →100%乙腈 →乙腈/异丙醇75/25 →100%异丙醇 →100%二氯甲烷 →100%正己烷 然后再反顺序变流动相冲回来 一定要注意，正己烷和乙腈等不能互溶，所以中间有异丙醇二氯甲烷过渡，二氯甲烷和水亦然，不要直接用大极性的，会不互溶 |
2楼2013-12-20 11:13:05
yyall
铜虫 (小有名气)
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我这边是累计使用造成的，基本上天天用10%甲醇水1.0ml/min冲洗30min,50%乙腈水或者90%乙腈水0.3ml/min冲洗过夜。异丙醇和二氯甲烷没有直接冲过，一般是进两到三针。3楼2013-12-20 12:00:32
5楼2013-12-22 23:20:35
