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cheng05jing

金虫 (小有名气)

[求助] 液相C18柱,柱长不同,250mm与200mm,会影响分离度吗? 已有3人参与

在做甘露糖和氨基葡萄糖的液相分析,将其PMP衍生化之后进高效液相色谱,衍生化反应及液相条件都是按药典的做的,柱子是C18柱,结果只显示PMP的峰,没有单糖甘露糖及氨基葡萄糖的峰,反应加进样重复了三次,效果都是一样的。
  会不会样品峰与PMP试剂峰重叠在一块了?
   其中一点不同的是药典中没有规定柱长的规格,一些文献中用的C18柱长为250mm,而我用的是200mm,会不会影响柱长与PMP的分离度或出峰时间呢?
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zhoulizwj

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+2, 3u 2013-10-16 17:24:00
会影响的,柱子长些的分离度更好啊,不过你这种情况不至于短柱上不出峰,长柱上就出峰,可能是液相条件不太合适,推到一块去了,建议你加大水的比例重新进样试试。
真的和感谢那些帮助过我的人们!
2楼2013-10-15 19:48:34
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cheng05jing

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhoulizwj at 2013-10-15 19:48:34
会影响的,柱子长些的分离度更好啊,不过你这种情况不至于短柱上不出峰,长柱上就出峰,可能是液相条件不太合适,推到一块去了,建议你加大水的比例重新进样试试。

水的比例现在是80%,0.02mol/L乙酸铵溶液,乙腈20%,加大水的比例,出峰时间就会延长,不过我试一下。
3楼2013-10-15 21:38:46
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sailorgg10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-16 17:32:47
不同厂家不同品牌的C18柱,对药物的分离度影响非常大。所以,你最好查阅相关文献,找出具体型号的C18柱再试试。
长柱的分离效果肯定好于短柱,但出峰时间长,柱压比短柱高。
4楼2013-10-16 16:15:48
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匿名

禁虫 (知名作家)

本帖仅楼主可见
5楼2013-12-12 20:58:46
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

色谱柱长度对分离度没有那么大的影响。建议换不同品牌的柱子再试下。还有注意是不是衍生化条件的影响。
学无止境
6楼2013-12-13 13:03:27
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深海之蓝zhb

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

柱子长短对分离多有影响,改变流动相对分离对也是有影响的,但是影响是有限的,换个新柱好很多
7楼2013-12-13 16:05:28
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lovelife2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

柱子越长分析的出峰时间越靠后,但是跟化合物直接的分离度应该没有太大的关系
8楼2014-03-04 11:10:30
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huangxia5823

新虫 (初入文坛)

柱长、柱温及流速都会影响分离度和出峰时间。一般没有特别规定都是250mm的柱子。
9楼2014-07-23 18:00:31
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