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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相C18柱，柱长不同，250mm与200mm，会影响分离度吗？
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cheng05jing

金虫 (小有名气)

[求助] 液相C18柱，柱长不同，250mm与200mm，会影响分离度吗？ 已有3人参与

在做甘露糖和氨基葡萄糖的液相分析，将其PMP衍生化之后进高效液相色谱，衍生化反应及液相条件都是按药典的做的，柱子是C18柱，结果只显示PMP的峰，没有单糖甘露糖及氨基葡萄糖的峰，反应加进样重复了三次，效果都是一样的。
  会不会样品峰与PMP试剂峰重叠在一块了？
   其中一点不同的是药典中没有规定柱长的规格，一些文献中用的C18柱长为250mm，而我用的是200mm，会不会影响柱长与PMP的分离度或出峰时间呢？
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1楼 2013-10-15 16:55:43
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zhoulizwj

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+2, 3u 2013-10-16 17:24:00
会影响的，柱子长些的分离度更好啊，不过你这种情况不至于短柱上不出峰，长柱上就出峰，可能是液相条件不太合适，推到一块去了，建议你加大水的比例重新进样试试。
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真的和感谢那些帮助过我的人们!
2楼2013-10-15 19:48:34
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cheng05jing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhoulizwj at 2013-10-15 19:48:34
会影响的，柱子长些的分离度更好啊，不过你这种情况不至于短柱上不出峰，长柱上就出峰，可能是液相条件不太合适，推到一块去了，建议你加大水的比例重新进样试试。

水的比例现在是80%,0.02mol/L乙酸铵溶液，乙腈20%，加大水的比例，出峰时间就会延长，不过我试一下。
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3楼2013-10-15 21:38:46
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sailorgg10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-10-16 17:32:47
不同厂家不同品牌的C18柱，对药物的分离度影响非常大。所以，你最好查阅相关文献，找出具体型号的C18柱再试试。
长柱的分离效果肯定好于短柱，但出峰时间长，柱压比短柱高。
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4楼2013-10-16 16:15:48
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匿名

禁虫 (知名作家)
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5楼2013-12-12 20:58:46
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

色谱柱长度对分离度没有那么大的影响。建议换不同品牌的柱子再试下。还有注意是不是衍生化条件的影响。
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学无止境
6楼2013-12-13 13:03:27
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深海之蓝zhb

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

柱子长短对分离多有影响，改变流动相对分离对也是有影响的，但是影响是有限的，换个新柱好很多
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7楼2013-12-13 16:05:28
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lovelife2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

柱子越长分析的出峰时间越靠后，但是跟化合物直接的分离度应该没有太大的关系
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8楼2014-03-04 11:10:30
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huangxia5823

新虫 (初入文坛)
柱长、柱温及流速都会影响分离度和出峰时间。一般没有特别规定都是250mm的柱子。
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9楼2014-07-23 18:00:31
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