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yyall

铜虫 (小有名气)

[求助] C18柱用的时间太长,柱压太高,怎么处理? 已有1人参与

C18柱用的时间太长,用过的缓冲盐太多,柱压太高,分离效果不是很好,很多小的杂质都挤到一块,并且主峰拖尾很严重,怎么处理?
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做最仔细的分析工作,用细致甚微弥补学历不足
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ivlovemoon

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yyall: 金币+2, 有帮助 2013-12-20 12:01:17
yyall: 金币+3, 有帮助, 色谱柱再生 2013-12-20 12:04:33
这个得看你的柱子是被什么污染的,也就是看你最近经常进什么,杂质一般是什么,针对性采用极性不用的流动相冲洗。
如果是长期使用的累积污染
一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来,每次用30-50柱体积的流动相冲,或者直接冲个30min
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%正己烷
然后再反顺序变流动相冲回来
一定要注意,正己烷和乙腈等不能互溶,所以中间有异丙醇二氯甲烷过渡,二氯甲烷和水亦然,不要直接用大极性的,会不互溶
2楼2013-12-20 11:13:05
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yyall

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ivlovemoon at 2013-12-20 11:13:05
这个得看你的柱子是被什么污染的,也就是看你最近经常进什么,杂质一般是什么,针对性采用极性不用的流动相冲洗。
如果是长期使用的累积污染
一般常见的冲洗顺序是从极性强冲到极性弱的然后再变回来,每次用30-50 ...

我这边是累计使用造成的,基本上天天用10%甲醇水1.0ml/min冲洗30min,50%乙腈水或者90%乙腈水0.3ml/min冲洗过夜。异丙醇和二氯甲烷没有直接冲过,一般是进两到三针。
还有是不是我的色谱柱使用时间太久了,已经到极限了。初步估算已经进过3600针样了。
做最仔细的分析工作,用细致甚微弥补学历不足
3楼2013-12-20 12:00:32
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yjlrx

金虫 (小有名气)

我觉得也可能是样品不干净或者买的缓冲盐级别不够,倒是可以在前面加一短的保护预柱,可以保护色谱柱,还能得到更稳定的基线,但是死体积会增加,不知会不会影响你的杂质分离。
4楼2013-12-22 14:09:49
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贾超斌

新虫 (初入文坛)

3600多针……柱压升高,用30%甲醇四十五度冲洗两个小时,应该可以解决。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-12-22 23:20:35
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yyall

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yjlrx at 2013-12-22 14:09:49
我觉得也可能是样品不干净或者买的缓冲盐级别不够,倒是可以在前面加一短的保护预柱,可以保护色谱柱,还能得到更稳定的基线,但是死体积会增加,不知会不会影响你的杂质分离。

保护住有加的,一直都有,并且不全溶的样品会进行过滤。
做最仔细的分析工作,用细致甚微弥补学历不足
6楼2013-12-23 09:08:24
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