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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 孢子DNA提取
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文飞778899

银虫 (小有名气)

[求助] 孢子DNA提取 已有2人参与

有提过从枝菌根单孢DNA的同仁吗?求救啊，我用nested-PCR,提不出来，都一个月了，体系换过确保体系没问题啊，可能是模板DNA提取有问题，我是单个孢子清洗后用无菌枪头压迫（因为孢子小，不确定有没有真正压破），加TE和chelex-100,95度5-10min中，再冰浴5分钟，离心提上清做模板DNA的。请教大神，AMF单孢DNA提取还有其他方法吗，还是有可以给我指点的意见，急，万分感谢！
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1楼 2013-12-15 22:27:36
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文飞778899

银虫 (小有名气)
大侠们,过来帮忙啊
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2楼2013-12-16 22:54:53
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JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
文飞778899: 金币+2, ★有帮助 2013-12-20 16:24:48
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助！ 2013-12-20 22:02:14
听实验室做真菌的同学说，孢子的DNA确实不好提。你换种破碎方式吧，比如球磨仪，比如电钻
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3楼2013-12-18 07:57:54
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entoloma

木虫 (正式写手)
公安局法医他们可以根据指纹上留下的汗液或者头发等微笑的东西检测出DNA，孢子的DNA提取估计差不多，两者应该有相似的地方，可惜不认识搞法医的人，若有，可借鉴。
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4楼2013-12-18 08:46:00
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xjldemon

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
文飞778899: 金币+2, ★有帮助 2013-12-20 16:25:36
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助！ 2013-12-20 22:03:08
我是做尖孢镰刀菌的，也提过孢子DNA，RNA，用的是小的电钻。
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5楼2013-12-19 10:54:02
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文飞778899

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by entoloma at 2013-12-18 08:46:00
公安局法医他们可以根据指纹上留下的汗液或者头发等微笑的东西检测出DNA，孢子的DNA提取估计差不多，两者应该有相似的地方，可惜不认识搞法医的人，若有，可借鉴。

谢谢
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6楼2013-12-20 15:15:13
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文飞778899

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by JNVBNC at 2013-12-18 07:57:54
听实验室做真菌的同学说，孢子的DNA确实不好提。你换种破碎方式吧，比如球磨仪，比如电钻

谢谢
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7楼2013-12-20 15:30:31
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文飞778899

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xjldemon at 2013-12-19 10:54:02
我是做尖孢镰刀菌的，也提过孢子DNA，RNA，用的是小的电钻。

谢谢
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8楼2013-12-20 16:25:25
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文飞778899

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by entoloma at 2013-12-18 08:46:00
公安局法医他们可以根据指纹上留下的汗液或者头发等微笑的东西检测出DNA，孢子的DNA提取估计差不多，两者应该有相似的地方，可惜不认识搞法医的人，若有，可借鉴。

谢谢
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9楼2013-12-20 16:26:13
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