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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Cacl2法制备的感受态竟然有抗性？
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

[求助] Cacl2法制备的感受态竟然有抗性？

大家帮忙分析下吧，我用Cacl2方法制备的感受态，在只加水作为阴性，质粒作为阳性的情况下转化，涂板，第二天阴性板上竟然会长出雾状的，仔细看是小颗粒状的点状菌，阳性的背景也是这样，但是会有大很多的有菌落正常形态的菌，这个是什么原因啊？菌种没有问题，AMP平板也有抗性 的，是我哪步做的不对吗？
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努力打败一切
1楼 2013-12-01 01:01:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你涂板涂的菌量太多了，导致你以为菌有抗性，很可能都是些死菌。
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10楼2013-12-03 20:28:47
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zjyswwx

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-01 01:22:57
这些菌本来就有抗性或已做过转化;现在含抗生素的洗手液到处都用,估计已经有了抗性。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2013-12-01 01:08:19
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 热心的专家顾问 2013-12-01 03:48:05
你做感受态的原菌株是哪里来的？有些公司做制备工程的感受态是本身具有某些抗性。此外，也可能是自己制备过程中染杂菌或者是抗性筛选平板的抗生素压力不足。
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3楼2013-12-01 02:35:21
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-04 02:11:27
原菌株可能被污染杂菌了
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6楼2013-12-01 12:40:05
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普通回帖

不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-04 12:15:49
原始菌液被污染了
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借你一生好不好
4楼2013-12-01 09:24:30
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王贤卓

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yangjingjing(myprayer代发): 金币+1, 鼓励发贴积极交流。 2013-12-04 12:15:58
你确定是感受态细胞？而不是染菌？
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5楼2013-12-01 11:16:40
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liygmail at 2013-12-01 12:40:05
原菌株可能被污染杂菌了

没有，我试了用amp的去接种，没有菌落生成的~~
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努力打败一切
7楼2013-12-01 13:10:16
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yy001519

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-04 02:11:41
可能感受态细胞被污染了，因为感受态本身很脆弱，很容易收外援干扰
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8楼2013-12-02 12:56:34
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yy001519 at 2013-12-02 12:56:34
可能感受态细胞被污染了，因为感受态本身很脆弱，很容易收外援干扰

感受态污染？我昨天又重新制备的，220rpm/50min，涂板，单纯的感受态完全没有长菌，阳性有。之前做的都是250rpm/1h，会不会是我摇的时间长的缘故？
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努力打败一切
9楼2013-12-02 13:32:53
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