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461153539

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于CaCl2法制备感受态细胞的问题 已有6人参与

CaCl2听一些朋友说要现配现用,重要的吗?Amp拼版的最终浓度你们都用多少的啊?另外关于CaCl2法制备感受态细胞你们都有什么经验技巧呢?请不吝赐教,谢过!!
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shaquila

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-15 09:19:39
不用现配现用,不会变质的…感受态操作要一直在冰上,这样比较好
2楼2011-04-15 08:42:32
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sxxuan

金虫 (著名写手)

只要不染菌就好
你的日子如何,你的力量也必如何!
3楼2011-04-15 08:59:20
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好!

优秀版主优秀版主

★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): good 2011-04-15 12:15:49
以前,我都是用的CaCl2的方法。觉得效果一般。
但是后来看《分子克隆》中有一种方法,特别的好用,转化效率极高。是CaCl2的改进法。使用TFB1和TFB2溶液来制的。
现在实验室都使用这个方法,建议您试一下。
第二,Amp我们一般是配置100mg/ml的浓度,1ml分装到每个离心管。使用时候,平板添加到越50mg/mL.

希望能帮到你!GOOD luck
最好的年龄是,那一天,终于知道并且坚信自己有多好,不是虚张,不是夸浮,不是众人捧,是内心明明澈澈知道:是的,我就是这么好。
4楼2011-04-15 10:08:59
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461153539

新虫 (初入文坛)

谢谢楼上各位!
5楼2011-04-16 09:58:38
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 鼓励 2011-04-16 14:50:55
引用回帖:
Originally posted by 461153539 at 2011-04-14 23:10:03:
CaCl2听一些朋友说要现配现用,重要的吗?Amp拼版的最终浓度你们都用多少的啊?另外关于CaCl2法制备感受态细胞你们都有什么经验技巧呢?请不吝赐教,谢过!!

没必要 现用现配吧!
Amp配成100mg/ml的母液,用的时候多少ml培养基加多少ul就好,即为稀释1000倍
6楼2011-04-16 10:42:52
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kwkw

木虫 (著名写手)

★ ★
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dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-04-17 14:24:56
建议用TSS法制备比你用的这种强多了
再苦:也别忘记坚持!再烦:也别忘记微笑!再急:也要注意语气!再累:也要爱自己!低调做人,你会一次比一次稳健。高调做事,你会一次比一次优秀!
7楼2011-04-17 11:14:16
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