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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于CaCl2法制备感受态细胞的问题
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461153539

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于CaCl2法制备感受态细胞的问题 已有6人参与

CaCl2听一些朋友说要现配现用，重要的吗？Amp拼版的最终浓度你们都用多少的啊？另外关于CaCl2法制备感受态细胞你们都有什么经验技巧呢？请不吝赐教，谢过！！
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1楼 2011-04-14 23:10:03
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): good 2011-04-15 12:15:49
以前，我都是用的CaCl2的方法。觉得效果一般。
但是后来看《分子克隆》中有一种方法，特别的好用，转化效率极高。是CaCl2的改进法。使用TFB1和TFB2溶液来制的。
现在实验室都使用这个方法，建议您试一下。
第二，Amp我们一般是配置100mg/ml的浓度，1ml分装到每个离心管。使用时候，平板添加到越50mg/mL.

希望能帮到你！GOOD luck
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
4楼2011-04-15 10:08:59
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shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-15 09:19:39
不用现配现用，不会变质的…感受态操作要一直在冰上，这样比较好
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2楼2011-04-15 08:42:32
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 鼓励 2011-04-16 14:50:55
引用回帖:
Originally posted by 461153539 at 2011-04-14 23:10:03:
CaCl2听一些朋友说要现配现用，重要的吗？Amp拼版的最终浓度你们都用多少的啊？另外关于CaCl2法制备感受态细胞你们都有什么经验技巧呢？请不吝赐教，谢过！！

没必要 现用现配吧！
Amp配成100mg/ml的母液，用的时候多少ml培养基加多少ul就好，即为稀释1000倍
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-04-16 10:42:52
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kwkw

木虫 (著名写手)
★ ★
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dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-04-17 14:24:56
建议用TSS法制备比你用的这种强多了
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再苦：也别忘记坚持！再烦：也别忘记微笑！再急：也要注意语气！再累：也要爱自己！低调做人，你会一次比一次稳健。高调做事，你会一次比一次优秀！
7楼2011-04-17 11:14:16
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