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Irus

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量pcr熔解曲线问题——质粒与样品的峰不在一条上 已有1人参与

如图,检测结果发现样品的条带较宽
荧光定量pcr熔解曲线问题——质粒与样品的峰不在一条上
熔解曲线
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real-time

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品纯度不够,有杂质(离子?)干扰,影响扩增和产物的溶解曲线
试试纯化样品再实验看
一步法逆转录RNA多重实时荧光定量PCR课题服务QQ461749807
9楼2013-12-03 11:44:11
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查看全部 17 个回答

yuxiangdan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-11-30 16:12:55
你扩增质粒上的序列不是你样品的基因吧?

[ 发自小木虫客户端 ]
成功者永不放弃,放弃者永不成功。
2楼2013-11-30 15:36:55
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-02 16:08:21
Irus: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-12-19 18:47:54
说明产物不相同。核对一下序列差别和引物特异性。
3楼2013-12-01 02:41:44
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Irus

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuxiangdan at 2013-11-30 15:36:55
你扩增质粒上的序列不是你样品的基因吧?

是一样的啊,质粒是用相同的DNA进行pcr之后胶回收在转化链接后培养然后用试剂盒提取的
4楼2013-12-01 08:44:15
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