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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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98sj

金虫 (小有名气)

[求助] 求助，最近做液相遇到各种问题，求解析

最近用液相分离物质，该物质是从细菌发酵液萃取获得，用甲醇萃取的，想分离单一成分化合物，用的C18的柱子，流动相：90%超纯水 10%甲醇5分钟 ；依次梯度洗脱至0%超纯水 100%甲醇 30分钟，出峰时间在10分钟内，且峰都分不开；想问怎么换改变条件？
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1楼 2013-11-28 21:46:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

haoyumomo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 98sj at 2013-11-29 20:33:49
性质不清楚，我打算分离出来测结构，那个菌是我们新分离的一株菌，到底会产生什么物质也不清楚，...

想必楼主不是天产化学出身，提取是提取，萃取是萃取。你的是细菌发酵液还是固体发酵物，如果你的是液体发酵液你需要的是与水不互溶的有机溶剂萃取比如说石油醚or乙酸乙酯。如果你的是固体发酵物你就可以死用甲醇提取。
你的液相 首先是梯度分析，分析的目的想知道化合物的极性大小，再根据梯度时间换算成等度洗脱剂，尝试将化合物峰拉开。
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7楼2013-11-30 22:08:41
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普通回帖

寒雨葭

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个流动相是你查的文献的么？怎么用甲醇萃取呀。。甲醇溶于水也溶于有机相。。就算用甲醇萃，说明甲醇对你需要的物质溶解度很好，流动相中用甲醇，物质都随着流动相跑出来了，自然分不太开。。

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98sj
寒雨葭，字淼炎。
2楼2013-11-28 22:49:29
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98sj

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 寒雨葭 at 2013-11-28 22:49:29
这个流动相是你查的文献的么？怎么用甲醇萃取呀。。甲醇溶于水也溶于有机相。。就算用甲醇萃，说明甲醇对你需要的物质溶解度很好，流动相中用甲醇，物质都随着流动相跑出来了，自然分不太开。。
...

嗯，查的文献，具体说用甲醇提取，我是先把发酵液浓缩至固体，然后用甲醇提取的，甲醇提取物里有我想要的东西，这个已经检测过，不是做液相要分离的物质最好用流动相来溶解吗？！我们实验室都是这样啊，如果你用乙腈做流动相，要分离的物质最好用乙腈溶解，这样不容易出杂峰，更精确
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3楼2013-11-29 15:13:51
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寒雨葭

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 98sj at 2013-11-29 15:13:51
嗯，查的文献，具体说用甲醇提取，我是先把发酵液浓缩至固体，然后用甲醇提取的，甲醇提取物里有我想要的东西，这个已经检测过，不是做液相要分离的物质最好用流动相来溶解吗？！我们实验室都是这样啊，如果你用乙 ...

汗~你帖子上说是甲醇萃取的。。只是用甲醇提取的啊。。你提取的东西性质是啥？~根据性质改流动相和柱子吧。。

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寒雨葭，字淼炎。
4楼2013-11-29 15:59:51
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98sj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寒雨葭 at 2013-11-29 15:59:51
汗~你帖子上说是甲醇萃取的。。只是用甲醇提取的啊。。你提取的东西性质是啥？~根据性质改流动相和柱子吧。。
...

性质不清楚，我打算分离出来测结构，那个菌是我们新分离的一株菌，到底会产生什么物质也不清楚，
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5楼2013-11-29 20:33:49
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haoyumomo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寒雨葭 at 2013-11-29 15:59:51
汗~你帖子上说是甲醇萃取的。。只是用甲醇提取的啊。。你提取的东西性质是啥？~根据性质改流动相和柱子吧。。
...

楼主的专业术语用的不好，迷惑人
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6楼2013-11-30 22:03:13
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chenyayun

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
得知道是哪几类化合物，你如果不知道，也不改流动相，联系装柱子先分，但要换其他填料

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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有善始者实繁，能克终者盖寡。
8楼2013-12-01 10:38:04
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98sj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by haoyumomo at 2013-11-30 22:08:41
想必楼主不是天产化学出身，提取是提取，萃取是萃取。你的是细菌发酵液还是固体发酵物，如果你的是液体发酵液你需要的是与水不互溶的有机溶剂萃取比如说石油醚or乙酸乙酯。如果你的是固体发酵物你就可以死用甲醇提 ...

等度洗脱已经试过，仍然分不开，目前尝试换柱子，谢谢
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9楼2013-12-02 20:02:23
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lanseyimi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

等度洗脱可以洗脱的时间长一些啊，你拖到多长时间就说分不开？如果实在不行换乙腈也可以啊，乙腈保留时间能短一些。实在不行那只有先大体分分然后做个H谱，看看什么结构 然后衍生化一下 再分
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10楼2013-12-02 20:08:23
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