24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1978  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

baiwei57

金虫 (正式写手)

[求助] WB实验问题求助

组蛋白H3荧光信号很强,但是曝光H3K9二甲基化位点和H3K4甲基化却无荧光,上样量及实验条件完全一致,请问什么原因?如何改进?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

好好过每一天
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woai43

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-27 12:38:34
gyesang: 回帖置顶 2013-11-27 12:38:35
baiwei57: 金币+2 2013-11-28 12:17:27
H3K9me2和H3K4me相对H3丰度低,估计是抗体的问题。如果有人工合成的带有H3K9me2修饰的histone tail,建议做个dot blot ,确定抗体是否能够识别这一修饰。
6楼2013-11-27 11:11:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Lovebirdshs

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-11-26 19:14:17
baiwei57: 金币+2, 有帮助 2013-11-26 20:08:26
甲基化后造成蛋白空间结构改变,结合基团被包埋导致曝光失败,这个以前遇到过的   也不是所有蛋白修饰后都会这样   运气比较差而已
孤独的舞者
4楼2013-11-26 18:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupeipei

铜虫 (初入文坛)

?跑电泳之前不是煮沸变性了吗,蛋白空间结构应该打开了呀,我看文献做的是小鼠肾脏,还有心脏的组蛋白H3的甲基化修饰都曝出来了
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
5楼2013-11-26 19:33:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupeipei

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by woai43 at 2013-11-27 11:11:57
H3K9me2和H3K4me相对H3丰度低,估计是抗体的问题。如果有人工合成的带有H3K9me2修饰的histone tail,建议做个dot blot ,确定抗体是否能够识别这一修饰。

抗体是一家公司(CST)的,同时买的,抗体说明书上的WB图片条带很清晰
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
7楼2013-11-27 15:37:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-16 15:18 by jiahl2024
[基金申请] RY:中国产出的科学垃圾论文,绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
信息提示
请填处理意见