应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » pEASY-T1 Cloning Kit 基因克隆相关问题
51/1返回列表
查看: 1416  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wanghf_6134

新虫 (初入文坛)

[求助] pEASY-T1 Cloning Kit 基因克隆相关问题

1.上回不小心用无菌水水配X-gal，发现不溶，又加了二甲基甲酰胺才把它溶了，这是唯一的补救措施了。但是，现在纠结要不要像IPTG一样，用0.22um的滤膜给它过滤（原来只有二甲基甲酰胺据说是不用的，但现在多了一个无菌水），这样做会不会把X-gal挡在外面？或者其他什么情况？
2.蓝白班培养，因为生长速度有些不同，能不能在冰箱里放一段时间组织它生长，它长出来的斑用掉，再放回恒温箱，还会再长吗？如果仅考虑到冰箱温度的问题，而不是时间。如果是时间，大概24个小时后，就不会长了吧？
3.用感受态trans1-t1 做克隆，培养基要调到多少呢？7.0？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-05 19:34:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by wanghf_6134 at 2013-11-06 13:09:22
那36小时长出来的是杂菌吧？我原先以为杂菌都是全部分布才是杂菌的...

应该算是杂菌
回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2013-11-06 13:48:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanghf_6134: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-06 15:51:24
1. X-gal按照你的配方，用不着过滤

2. 平板可以一直放培养箱16小时左右，然后挑菌落鉴定，菌落太小不要紧，你说的方法麻烦且不可取

3. Trans1-T1的培养基不用调pH
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-06 01:53:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghf_6134

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-06 01:53:58
1. X-gal按照你的配方，用不着过滤

2. 平板可以一直放培养箱16小时左右，然后挑菌落鉴定，菌落太小不要紧，你说的方法麻烦且不可取

3. Trans1-T1的培养基不用调pH

2.不可取在什么地方？昨天挑错菌落了，我用比菌落大的直径孔去挑，同学说不可取的，会有杂菌，然后因为我把培养皿内又放回恒温箱了，36个小时后的斑还可以要吗？
3.不知是不是我没调ph的问题，12小时不长，16小时4个白班，20小时才出现10个白斑，1个蓝斑。挑了ph效果会不会好点？
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-06 08:38:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanghf_6134: 金币+3 2013-11-06 15:55:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanghf_6134 at 2013-11-06 08:38:30
2.不可取在什么地方？昨天挑错菌落了，我用比菌落大的直径孔去挑，同学说不可取的，会有杂菌，然后因为我把培养皿内又放回恒温箱了，36个小时后的斑还可以要吗？
3.不知是不是我没调ph的问题，12小时不长，16小时 ...

2. 反复放培养箱会有杂菌长出来，会很容易出现卫星菌落，你说用比菌落大的直径孔去挑，你同学说不可取，会有杂菌，但你已经做了，我认为影响不大，如果是杂菌的话，在抗性培养基里是长不起来的，36小时才长起来的，一般都不对，何况你用的是Trans1-T1感受态，这个菌株长的飞快，9小时就可以挑菌落了

3. LB培养基没有那么严格，白斑长的少不是平板的问题
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-11-06 10:14:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 299求调剂 +3 某某某某位 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:11 by zhukairuo
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +3 lemonzzn 2026-03-17 5/250 2026-03-21 11:28 by lemonzzn
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 洼小桶 2026-03-18 3/150 2026-03-20 22:54 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:38 by 学员8dgXkO
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:35 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭